低毒性荧光探针,活细胞染色必备!
良好兼容性,检测指标更直接!
细胞凋亡机制复杂,涉及分子众多,检测方法也是多种多样。小编在这里为大家简单总结,
方法 | 原理 | 产品编号 |
形态学检测 | 台盼兰、碘化丙啶;DAPI、Hoechst 33342和Hoechst 33258;Giemsa染色法 | C1005;ST511;C1011;C1022;C1052;C1056;ST798;C1002 |
流式细胞仪检测 | 荧光素标记的Annexin V与磷脂酰丝氨酸高度亲和,利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生 | C1062;C1065S;C1067S |
DNA电泳检测 | DNA ladder | C0007;C0008 |
DNA断裂的原位末端标记法 | TUNEL法 | C1082;C1086;C1089;C1091 |
Western Blot检测关键蛋白 | western blot检测凋亡通路明星蛋白 | AF1243;AF1264; 更多抗体详见官网 |
其他检测方法 | 借助凋亡过程中Caspase激活、Cyt c的释放、线粒体膜电位的变化等进行检测 | C1168;C2006;C1071 |
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除了这些,碧云天全新推出C2009 线粒体通透性转换孔检测试剂盒,采用膜通透性的C2012 Calcein AM (钙黄绿素AM)荧光探针检测线粒体通透性转换孔(MPTP)开放程度,适用于荧光显微镜和流式细胞仪,可用于细胞凋亡、坏死等细胞死亡研究。
线粒体通透性转换孔(MPTP)的开放是引起细胞死亡的关键事件,在细胞的生存和凋亡的调控过程中扮演着重要角色,同时线粒体通透性转换孔(MPTP)在心肌缺血、再灌注损伤、创伤性脑损伤、中风等心血管疾病及肿瘤、衰老、神经变性等多个方面都有重要作用。
检测原理
图1. 线粒体通透性转换孔(MPTP)检测试剂盒原理图。荧光探针钙黄绿素乙酰甲酯(Calcein AM)通过被动运输进入活细胞后被酯酶(Esterase)催化生成钙黄绿素(Calcein),整个细胞都呈现很强的绿色荧光;氯化钴(含Co2+)处理后,呈现绿色荧光的Calcein结合钴离子生成没有荧光的Calcein-2Co,但正常情况下线粒体的MPTP没有打开,从而钴离子不能进入线粒体,因此此时仅线粒体中呈现绿色荧光;如果采用阳性对照钙离子载体(Ionomycin)处理后,钙离子大量进入细胞内和线粒体基质,导致MPTP打开,使部分Calcein从线粒体内释放,和胞浆中的钴离子结合而失去荧光。同时钴离子进入线粒体内从而使线粒体内呈现绿色荧光的Calcein也生成了没有荧光的Calcein-2Co。如果有样品可以诱导MPTP的部分或全部打开,就会导致线粒体中的绿色荧光减弱甚至消失。这样就可以根据线粒体中Calcein绿色荧光的强弱来判断线粒体MPTP开放的程度,绿色荧光越强,开放程度越低,绿色荧光越弱开放程度越高。
产品特点
检测指标更直接
本试剂盒与传统的检测线粒体膜电位方法相比,能够更直接地检测线粒体通透性转换孔开放程度的变化;
荧光探针毒性更低
由于C2012 Calcein AM (钙黄绿素AM)的毒性特别低,并且不会抑制细胞的增殖、趋化性等绝大部分功能,所以与其它同类产品如CFDA SE等相比是更适合染活细胞的荧光探针;
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兼容性好
后续还可进行其他非绿色荧光染色,例如采用Annexin V-PE细胞凋亡检测试剂盒(C1065)或细胞凋亡与坏死检测试剂盒(C1056)检测细胞凋亡、Mito-Tracker Red CMXRos (C1049)检测线粒体活力、Hoechst 33342活细胞染色液(C1027/C1028/C1029)染色细胞核等。
检测效果
图2. 使用线粒体通透性转换孔(MPTP)检测试剂盒检测MPTP开放的效果图。Calcein AM (1X)与L-929细胞进行孵育,细胞质包括线粒体发出强绿色荧光(A);细胞进一步与CoCl2 (1X)孵育以后,细胞质内Calcein的绿色荧光被CoCl2淬灭,仅留下线粒体内的绿色荧光(B);使用Ionomycin (1X)处理细胞,诱导细胞外的Ca2+大量进入细胞内,过多的Ca2+进入线粒体基质,导致MPTP的开放,使部分Calcein从线粒体内释放,同时使钴离子进入线粒体内并导致Calcein的绿色荧光淬灭(C);使用解耦联剂CCCP和FCCP (5μM)处理细胞,虽然线粒体膜电位丢失,但短时间内不会直接引起MPTP的开放,因此线粒体内绿色荧光强度无明显变化(D、E)。
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相关产品:
产品编号 | 产品名称 | 包装 | 产品价格 |
C2009S | 线粒体通透性转换孔(MPTP)检测试剂盒 | 100-1000次 | 1788.00元 |
C2012-0.1ml | Calcein AM (钙黄绿素AM) | 2mM×0.1ml | 268.00元 |
C2012-0.5ml | Calcein AM (钙黄绿素AM) | 2mM×0.5ml | 898.00元 |
C1031 | CFDA SE (细胞增殖示踪荧光探针) | 5mg | 732.00元 |
C1049-50µg | Mito-Tracker Red CMXRos (线粒体红色荧光探针) | 50µg | 268.00元 |
C1049-250µg | Mito-Tracker Red CMXRos (线粒体红色荧光探针) | 50µg×5 | 788.00元 |
C1056 | 细胞凋亡与坏死检测试剂盒 | 100次 | 223.00元 |
C1065S | Annexin V-PE细胞凋亡检测试剂盒 | 20次 | 716.00元 |
C1065M | Annexin V-PE细胞凋亡检测试剂盒 | 50次 | 1188.00元 |
C1065L | Annexin V-PE细胞凋亡检测试剂盒 | 100次 | 1698.00元 |
C1071S | 线粒体膜电位与细胞凋亡检测试剂盒 | 20次 | 658.00元 |
C1071M | 线粒体膜电位与细胞凋亡检测试剂盒 | 50次 | 1168.00元 |
C2005 | JC-1 | 1mg | 791.00元 |
C2006 | 线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1) | >100次 | 909.00元 |