产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
S0112S | Amplex Red黄嘌呤氧化酶活性检测试剂盒 | 100次 | 598.00元 |
S0112M | Amplex Red黄嘌呤氧化酶活性检测试剂盒 | 500次 | 2398.00元 |
碧云天研发的Amplex Red黄嘌呤氧化酶活性检测试剂盒,即Amplex Red Xanthine Oxidase Assay Kit,也称Amplex Red XO Assay Kit或Amplex Red XOD Assay Kit,是一种基于探针Amplex Red利用荧光或吸光度检测,快速、高灵敏地对血清、血浆、尿液等生物体液、细胞培养上清以及组织或细胞样品中黄嘌呤氧化酶活性进行检测的试剂盒。通常0.1-1µl血清或血浆样品就足够用于本试剂盒的荧光法检测。
黄嘌呤氧化酶(Xanthine oxidase, XO or XOD)是体内核酸代谢中的一种重要酶,可以催化次黄嘌呤氧化为黄嘌呤,并能进一步催化黄嘌呤氧化为尿酸,同时产生过氧化氢以及超氧化物阴离子的一系列氧化反应,在包括人类在内的一些物种中的嘌呤分解代谢中起着重要作用[1]。在人类及其它灵长类动物中,XO通常存在于血清、肺、肝脏和肠黏膜中。在啮齿类动物中,XO在大部分组织中均有表达。血液中XO的活性通常都很低。当感染甲型流感时,血清及肺部的XO活性会增加[2]。当肝功能受损时,XO会大量释放到血液中,因此检测血液中XO水平被作为一个评估严重肝损伤(例如黄疸)的灵敏指标[3]。
本试剂盒中的Amplex Red是一种对H2O2高度敏感的荧光探针。在辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase, HRP)存在的情况下,Amplex Red能与H2O2 1:1反应,产生强烈的红色荧光物质试卤灵(Resorufin)。试卤灵的最大激发波长为571nm,最大发射波长为585nm,并且在激发波长处有很强的可见光吸收。因此本试剂盒可以用吸光度和荧光两种方法来进行检测。
本试剂盒的检测原理请参考图1。在黄嘌呤氧化酶(XO)的催化作用下,黄嘌呤(Xanthine)和氧气发生氧化反应生成尿酸(Uric acid)和H2O2,再通过检测H2O2与Amplex Red的反应产物试卤灵的荧光强度或吸光度来最终计算黄嘌呤氧化酶的酶活性。试卤灵的荧光强度和吸光度与样品中黄嘌呤氧化酶的活性成正比。
图1.碧云天Amplex Red黄嘌呤氧化酶活性检测试剂盒(S0112)的原理图。
本试剂盒检测灵敏度高,线性范围宽,样品用量少。本试剂盒在样品体积为20µl时,采用吸光度检测可以检测活性低至2μU的黄嘌呤氧化酶,在0.1-2mU/ml (2-40μU)活性范围内有良好的线性关系;采用荧光检测可以检测活性低至0.2μU的黄嘌呤氧化酶,在0.01-1mU/ml (0.2-20μU)活性范围内有良好的线性关系。荧光检测灵敏度比吸光度检测高约10倍,可以使用更少量的样品。本试剂盒提供了配制黄嘌呤氧化酶标准溶液的XO (1U/ml),可以通过绘制标准曲线(图2),计算出样品中黄嘌呤氧化酶的活性。
图2.碧云天Amplex Red黄嘌呤氧化酶活性检测试剂盒(S0112)检测黄嘌呤氧化酶标准曲线的效果图。左图为吸光度检测,右图为荧光检测。本试剂盒采用吸光度检测时,在0.1-2mU/ml活性范围内有良好的线性关系;采用荧光检测时,在0.01-1mU/ml活性范围内有良好的线性关系。实际检测数据会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。
本试剂盒检测方法灵活,检测速度快。相较于黄嘌呤氧化酶活性检测试剂盒(WST-8法) (S0110),本试剂盒的检测灵敏度更高、检测方法更加灵活。本试剂盒既可以进行荧光检测,也可进行吸光度检测。整个检测过程约40分钟即可完成。
本试剂盒提供的检测裂解液有一定的通用性。使用本试剂盒中的BeyoLysis™ Buffer A for Metabolic Assay裂解获得的细胞或组织样品,也可以用于碧云天生产的其它代谢类试剂盒中同样使用BeyoLysis™ Buffer A for Metabolic Assay进行裂解的样品检测,通用性强;而且还可用于检测蛋白浓度、进行SDS-PAGE或一些较易溶解蛋白的Western检测。
本试剂盒适用范围广。本试剂盒可用于小鼠、大鼠、人等的血清、血浆、尿液等生物体液,细胞培养上清、组织或细胞样品等的检测。本试剂盒不仅适合少量样品的检测,也非常适合高通量筛选(High-throughput screening)的自动化操作系统。
按照使用说明操作,用于96孔板检测时,本试剂盒的小包装可以进行100次检测,中包装可以进行500次检测。
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
S0112S-1 | BeyoLysis™ Buffer A for Metabolic Assay | 30ml |
S0112S-2 | XO Assay Buffer | 30ml |
S0112S-3 | Amplex Red | 200µl |
S0112S-4 | XO (1U/ml) | 50µl |
S0112S-5 | XO Developer | 200µl |
S0112S-6 | XO Substrate | 200µl |
— | 说明书 | 1份 |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
S0112M-1 | BeyoLysis™ Buffer A for Metabolic Assay | 120ml |
S0112M-2 | XO Assay Buffer | 120ml |
S0112M-3 | Amplex Red | 1ml |
S0112M-4 | XO (1U/ml) | 250µl |
S0112M-5 | XO Developer | 1ml |
S0112M-6 | XO Substrate | 1ml |
— | 说明书 | 1份 |
-20ºC保存,一年有效。Amplex Red和XO Developer须避光保存。
注意事项:Amplex Red在空气中不太稳定,开启后应尽快使用,且在使用过程中须注意适当避光。
Amplex Red的反应产物在还原剂的存在下会很不稳定,因此最终反应体系中的二硫苏糖醇(DTT)、β-巯基乙醇或类似还原剂的浓度应低于10µM。
请确保反应体系的pH值在7-8之间,否则会影响Amplex Red的稳定性和荧光值。
Amplex Red和XO Assay Buffer需要完全解冻并平衡至室温后再使用,否则会影响检测结果。其它溶液使用时应在冰上进行。
血清等样品如在4ºC保存,保存时间不得超过2周,否则会影响检测结果的准确性。通常血清样品宜-20ºC保存,-80ºC保存更佳。
为减少稀释液产生的背景带来的误差,样品和XO (1U/ml)的稀释液应该根据样品的种类来定。当样品为BeyoLysis™ Buffer A for Metabolic Assay制备的细胞或组织的裂解样品时,应使用BeyoLysis™ Buffer A for Metabolic Assay稀释,当样品为血液等其它样品时,应使用XO Assay Buffer稀释。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
Samples | 1 | 10 | 20 | 50 |
XO Assay Buffer (μl) | 74 | 740 | 1480 | 3700 |
Amplex Red (μl) | 2 | 20 | 40 | 100 |
XO Developer (μl) | 2 | 20 | 40 | 100 |
XO Substrate (μl) | 2 | 20 | 40 | 100 |
Amplex Red Working Solution (μl) | 80 | 800 | 1600 | 4000 |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
C0016/C0017 | 乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒 | 100次/500次 |
C0018 | 乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒(WST-8法) | 100次/500次 |
S0110S | 黄嘌呤氧化酶活性检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0111S | 黄嘌呤氧化酶抑制剂筛选试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0112S | Amplex Red黄嘌呤氧化酶活性检测试剂盒 | 100次 |
S0113S | Amplex Red黄嘌呤氧化酶抑制剂筛选试剂盒 | 100次 |
S0114S | 黄嘌呤/次黄嘌呤检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0204S | D-乳酸检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0208S | L-乳酸检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0211S | Amplex Red胆固醇与胆固醇酯检测试剂盒 | 100次 |
S0215S | Amplex Red游离脂肪酸检测试剂盒 | 100次 |
S0219S | Amplex Red甘油三酯检测试剂盒 | 100次 |
S0223S | Amplex Red甘油检测试剂盒 | 100次 |
S0227S | Amplex Red乳酸检测试剂盒 | 100次 |
S0231S | Amplex Red尿酸与尿酸酶检测试剂盒 | 100次 |
S0235S | Amplex Red磷酸盐检测试剂盒 | 100次 |
S0239S | Amplex Red乙醇检测试剂盒 | 100次 |
S0243S | Amplex Red黄嘌呤/次黄嘌呤检测试剂盒 | 100次 |
S0247S | Amplex Red谷氨酸与谷氨酸氧化酶检测试剂盒 | 100次 |
S0251S | Amplex Red过氧化氢与过氧化物酶检测试剂盒 | 100次 |
S0255S | Amplex Red过氧化氢酶检测试剂盒 | 100次 |
S0259S | Amplex Red单胺氧化酶检测试剂盒 | 100次 |
S0263S | Amplex Red鞘磷脂酶检测试剂盒 | 100次 |
S0267S | Amplex Red胆碱与乙酰胆碱检测试剂盒 | 100次 |
S0271S | Amplex Red乙酰胆碱酯酶检测试剂盒 | 100次 |
S0275S | Amplex Red磷脂酰胆碱检测试剂盒 | 100次 |
S0279S | Amplex Red磷脂酶D检测试剂盒 | 100次 |
S0283S | Amplex Red肌酸检测试剂盒 | 100次 |
S0287S | Amplex Red肌酸激酶检测试剂盒 | 100次 |
S0291S | Amplex Red肌酸酐检测试剂盒 | 100次 |
S0295S | Amplex Red肌酸氨检测试剂盒 | 100次 |
S0299S | Amplex Red丙酮酸检测试剂盒 | 100次 |
S0303S | Amplex Red丙酮酸激酶检测试剂盒 | 100次 |
S0307S | Amplex Red ADP检测试剂盒 | 100次 |
S0311S | Amplex Red磷酸烯醇式丙酮酸检测试剂盒 | 100次 |
S0315S | Amplex Red丙氨酸检测试剂盒 | 100次 |
S0319S | Amplex Red丙氨酸转氨酶检测试剂盒 | 100次 |
S0323S | Amplex Red α-酮戊二酸检测试剂盒 | 100次 |
S0327S | Amplex Red天冬氨酸检测试剂盒 | 100次 |
S0331S | Amplex Red天冬氨酸氨基转移酶检测试剂盒 | 100次 |
S0335S | Amplex Red柠檬酸检测试剂盒 | 100次 |
S0339S | Amplex Red草酰乙酸检测试剂盒 | 100次 |
S0343S | Amplex Red葡萄糖检测试剂盒 | 100次 |
S0347S | Amplex Red葡萄糖氧化酶检测试剂盒 | 100次 |
S0351S | Amplex Red果糖检测试剂盒 | 100次 |
S0355S | Amplex Red乳糖检测试剂盒 | 100次 |
S0359S | Amplex Red半乳糖与乳糖检测试剂盒 | 100次 |
S0363S | Amplex Red半乳糖与半乳糖氧化酶检测试剂盒 | 100次 |
S0367S | Amplex Red麦芽糖检测试剂盒 | 100次 |
S0371S | Amplex Red麦芽糖与葡萄糖检测试剂盒 | 100次 |
S0375S | Amplex Red糖原检测试剂盒 | 100次 |
S0379S | Amplex Red磷酸果糖激酶检测试剂盒 | 100次 |
S0383S | Amplex Red乙酰辅酶A检测试剂盒 | 100次 |
S0387S | Amplex Red辅酶A检测试剂盒 | 100次 |
S0391S | Amplex Red乙酰辅酶A合成酶检测试剂盒 | 100次 |
S0511S | L-苹果酸检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0514S | 苹果酸脱氢酶活性检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0517S | 延胡索酸检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0520S | 延胡索酸酶活性检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0523S | 异柠檬酸检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0526S | 异柠檬酸脱氢酶活性检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0529S | Amplex Red琥珀酸检测试剂盒 | 100次 |
S0530S | 琥珀酸脱氢酶活性检测试剂盒(显色法) | 100次 |
S0532S | Amplex Red琥珀酰辅酶A合成酶检测试剂盒 | 100次 |
S0535S | 支链氨基酸检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0538S | N-乙酰氨基葡萄糖苷酶活性检测试剂盒(显色法) | 100次 |
S0540S | 酪氨酸检测试剂盒(显色法) | 100次 |
S0542S | 酪氨酸酶活性检测试剂盒(显色法) | 100次 |
S0545S | 酪氨酸酶抑制剂筛选试剂盒(显色法) | 100次 |
S0547S | 髓过氧化物酶活性检测试剂盒(显色法) | 100次 |
S0548S | Amplex Red髓过氧化物酶活性检测试剂盒 | 100次 |
S0550S | Amplex Red髓过氧化物酶抑制剂筛选试剂盒 | 100次 |