产品简介：

    WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation.
    H, human; M, mouse; R, rat.
    本Phospho-FoxO1(Thr24)/FoxO3a(Thr32)抗体(Phospho-FoxO1(Thr24)/FoxO3a(Thr32)antibody)为进口分装，用人工合成的含磷酸化Thr28的一段人FoxO4多肽进行适当修饰后免疫rabbit，然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度抗体。
    本Phospho-FoxO1(Thr24)/FoxO3a(Thr32)抗体可以检测内源性的Thr24被磷酸化的FoxO1或Thr32位磷酸化的FoxO3a，也可检测内源性的Thr28被磷酸化的FoxO4。不识别其它位点磷酸化的FoxO1。
    转录因子Forkhead家族蛋白与横纹肌肉瘤、急性白血病等肿瘤发生有关。该转录因子蛋白家族中的FoxO1,FoxO4和FoxO3a，和线虫同源蛋白DAF-16的序列高度相似，介导了包括IGFR1,PI3K和Akt在内的信号转导通路。Forkhead家族蛋白激活后，可通过促进细胞周期阻滞(cell cycle arrest)和细胞凋亡而抑制肿瘤。高表达Forkhead家族蛋白会导致细胞周期抑制蛋白p27Kip1的激活。同时Forkhead家族蛋白在TGF-β介导的p21CIP1上调中起作用，而该过程又可被PI3K所负调控。胰岛素等诱导的增殖信号会导致FoxO蛋白通过Akt介导的Thr24、Ser256和Ser319位点的磷酸化，导致FoxO从细胞核中转运到细胞浆中，从而抑制其转录活性。FoxO还可以被Sirt1、p300等进行乙酰化调控。
    FoxO1，也称FoxO1a、FKH1或FKHR，属于Forkhead蛋白家族中的O亚家族(O subclass)，对于机体正常生长发育是必需的。研究表明，FoxO1参与多种多样的细胞功能，包括长寿、代谢、繁殖、胰岛素调节、细胞周期、凋亡和应激反应等。FoxO1参与通过PI3K信号通路的生长信号应答。FoxO1三个保守的serine/threonine位点被Akt磷酸化后，可导致其从细胞核向细胞浆转运和基因转录活性的抑制。
    配套提供了Western一抗稀释液，可以用于Western检测时的一抗稀释。
    建议抗体使用时的稀释比例如下(实际使用时需根据抗原水平的高低作适当调整)：

    本抗体如果用于常规的Western检测，至少可以检测20次。
包装清单：

保存条件：
    Phospho-FoxO1(Thr24)/FoxO3a(Thr32)抗体-20℃保存，Western一抗稀释液-20℃或4℃保存，一年有效。Western一抗稀释液优先推荐4℃保存，长期不使用可以考虑-20℃保存，但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。
注意事项：
    对于本抗体，Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜，如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。
    在Western实验后，请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，4℃保存。
    回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。
    为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。