产品简介:
碧云天生产的Annealing Buffer for RNA Oligos(5X),即RNA寡核苷酸退火缓冲液,是一种经过我们多次实验证实、可以用于RNA oligo退火的缓冲液。用于siRNA而合成的互补的RNA oligo可以用该退火缓冲液进行退火,以形成双链RNA。使用碧云天生产的Annealing Buffer for RNA Oligos(5X),可以有效避免RNA oligo自身形成发夹结构,有利于退火的正确进行。
使用本试剂盒操作非常简单,只需把待退火的RNA oligo和Annealing Buffer for RNA Oligos(5X)按照一定比例混合后,置于PCR仪上,约60分钟即可完成。
Annealing Buffer for RNA Oligos(5X)经过特殊处理,不含RNase,可避免RNA的降解。
如果一次退火反应体积为100微升,一个包装的退火缓冲液可以进行50次退火反应。
包装清单:
产品编号 |
产品名称 |
包装 |
R0051 |
Annealing Buffer for RNA Oligos(5X) |
1ml |
— |
说明书 |
1份 |
保存条件:
-20℃保存,一年有效。
注意事项:
Annealing Buffer for RNA Oligos(5X)只适合于RNA oligo的退火,不适合用于DNA oligo 的退火。
由于RNA非常容易被降解,一定要严格遵守RNA的操作规范,防止RNase污染。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
1. 把待退火的RNA oligo用DEPC水配制成200μM。溶解Annealing Buffer for RNA Oligos(5X),混匀备用。
2. 如下设置退火反应体系:
DEPC水 |
30μl |
Annealing Buffer for RNA Oligos(5X) |
20μl |
RNA oligo A(200μM) |
25μl |
RNA oligo B(200μM) |
25μl |
总体积 |
100μl |
按照上述顺序依次加入各种试剂,混匀。如果用的PCR仪没有热盖,在反应体系上加入一滴矿物油
(mineral oil)以防止蒸发。
3. 如下设置PCR仪进行退火反应:
步骤 |
温度 |
时间 |
说明 |
1 |
90℃ |
1分钟 |
让oligo充分变性 |
2 |
每5秒下降0.1℃,降至25℃ |
约60分钟 |
退火 |
3 |
4℃ |
长时间保持 |
暂时存放 |
4. 退火结束后可以直接用于转染细胞,也可以-20℃冻存备用。