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产品简介
产品简介：
| 产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
| C0605 | 溶酶体β-半乳糖苷酶染色试剂盒 | >100次 | 473.00元 |
溶酶体β-半乳糖苷酶染色试剂盒(Lysosomal β-Galactosidase Staining Kit)是一种对溶酶体中酸性β-半乳糖苷酶进行染色检测的试剂盒，常用作细胞衰老检测时的对照。在普通的光学显微镜下就可以观测到细胞或组织中溶酶体酸性β-半乳糖苷酶的活力水平情况。本试剂盒可以用于培养细胞的检测，也可以用于组织切片的检测。
绝大多数正常细胞都可以检测到较高水平的溶酶体β-半乳糖苷酶活性水平。可以用作细胞衰老β-半乳糖苷酶染色时的参考染色。细胞衰老特异的β-半乳糖苷酶仅在衰老时表达，而溶酶体β-半乳糖苷酶几乎在任何情况下都表达。
碧云天生产的溶酶体β-半乳糖苷酶染色试剂盒，以X-Gal为底物，在溶酶体酸性β-半乳糖苷酶的催化下会生成深蓝色产物。从而在光学显微镜下很容易观察到变成蓝色的表达β-半乳糖苷酶的细胞或组织。
本试剂盒仅染色溶酶体酸性β-半乳糖苷酶，不会染色衰老特异性的β-半乳糖苷酶，也不会染色外源转染表达的用于报告基因的β-半乳糖苷酶(大肠杆菌的β-半乳糖苷酶)。
如果使用6孔板检测，足够测定100个样品；使用24孔板测定，足够测定400个样品；使用96孔板测定，足够测定1000个样品。对于组织切片或组织块，可以检测的样品数量视样品的大小而定。对于普通切片的滴染足够检测100个样品。
包装清单：
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| C0605-1 | β-半乳糖苷酶染色固定液 | 100ml |
| C0605-2 | X-Gal溶液 | 5ml |
| C0605-3 | β-半乳糖苷酶染色液A | 1ml |
| C0605-4 | β-半乳糖苷酶染色液B | 1ml |
| C0605-5 | β-半乳糖苷酶染色液C | 100ml |
| － | 说明书 | 1份 |
保存条件：
-20℃保存，一年有效。其中X-Gal溶液需避光保存。
注意事项：
β-半乳糖苷酶染色固定液有一定的腐蚀性和毒性，操作时请注意防护。
β-半乳糖苷酶染色液B在刚刚溶解后会观察到有沉淀，属正常现象，充分混匀或Vortex后，沉淀会全部溶解。作为常规，试剂使用前必须确保沉淀全部溶解，并且混匀。
配制染色工作液时需使用聚丙烯(polypropylene)容器或玻璃容器，不宜使用聚苯乙烯(polystyrene)容器。但染色时可以在聚苯乙烯(polystyrene)容器中进行，例如普通的6孔板就可以用作染色的容器。
需自备PBS或HBSS(Hanks Balanced Salt Solution)。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明
使用说明：
1. 对于贴壁细胞：
a. 对于6孔板中培养的细胞，吸除细胞培养液，用PBS或HBSS洗涤1次，加入1毫升β-半乳糖苷酶染色固定液，室温固定15分钟。对于其它类型的培养板，固定液及后续溶液的用量参照此比例进行操作。
b. 吸除细胞固定液，用PBS或HBSS洗涤细胞3次，每次3分钟。
c. 吸除PBS或HBSS，每孔加入1毫升染色工作液。使用聚丙烯(polypropylene)容器，不能使用聚苯乙烯(polystyrene)容器配制染色工作液。染色工作液的配制方法参考表1。
表1. 染色工作液的配制方法。
| β-半乳糖苷酶染色液A | 10μl |
| β-半乳糖苷酶染色液B | 10μl |
| β-半乳糖苷酶染色液C | 930μl |
| X-Gal溶液 | 50μl |
说明：对于聚丙烯容器和聚苯乙烯容器的简单的判定方法是：聚丙烯容器可以高温高压灭菌；而聚苯乙烯容器不适合高温高压灭菌，一旦高温高压处理就会严重变形。
d. 37℃孵育过夜，可以用parafilm或保鲜膜封住6孔板防止蒸发。
e. 普通光学显微镜下观察。如不能及时观察计数，可以去除染色工作液，加入2毫升PBS，4℃可以保存数天；或者加上封片液封片后，4℃可以保存较长时间。
2. 对于悬浮细胞：
a. 离心收集细胞至1.5ml离心管内，用PBS或HBSS洗涤1次，加入1毫升β-半乳糖苷酶染色固定液，室温固定15分钟。固定时可以在摇床上缓慢摇动，以避免细胞结成团块。
b. 离心，吸除细胞固定液，用PBS或HBSS洗涤细胞3次，每次3分钟。
c. 离心，吸除PBS或HBSS，每管加入0.5-1毫升染色工作液。染色工作液的配制方法参考表1。
d. 37℃孵育过夜。
e. 取部分染色后的细胞，滴加到载玻片上或6孔板内，普通光学显微镜下观察。如不能及时观察计数，可以离心，去除染色工作液，然后加入1毫升PBS，4℃可以保存数天。如果离心，取细胞用于涂片，加上封片液封片后，4℃可以保存较长时间。
3. 对于组织切片：
a. 对于石蜡切片先按照常规方法进行脱蜡和水化处理。对于冷冻切片直接按照以下步骤进行。
b. 加入适当体积的β-半乳糖苷酶染色固定液，以充分盖住组织为宜，室温固定不少于15分钟。
c. 用PBS浸泡洗涤组织3次，每次不少于5分钟。
d. 吸除PBS，加入适当量的染色工作液。染色工作液的配制方法参考表1。
e. 37℃孵育过夜，可以用parafilm或保鲜膜封住防止蒸发。最好把整个切片浸泡在染色工作液中。
f. 普通光学显微镜下观察。如不能及时观察，加上封片液封片后4℃可以保存较长时间。
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1. Yang Z, Zhang Y, Yang Y, Sun L, Han D, Li H, Wang C.
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Nanomedicine. 2010;6(3):427-41. Epub 2010 Jan 4.
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