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400-1683301
800-8283301
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order@beyotime.com
娴肩姷婀$拋銏f彛:
0513-82105722
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NheI

 产品编号D6489
 产品包装: 200U
 产品价格: 128.00元
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产品简介

产品简介:

产品编号 产品名称 产品包装 产品价格

D6489

NheI

200U

128.00元

    NheI内切酶为进口分装,基本信息如下:

识别序列

缓冲液兼容性(%)

酶切温度

失活条件

甲基化干扰?

G^CTAGC
CGATC^G

1X B

1X G

1X O

1X R

1X Y

2X Y

37℃

65℃
20min

有时有干扰

100

20-50

0-20

0-20

100

0-20

    根据识别序列邻近序列的不同,酶切效果受GC methylase导致的DNA甲基化的影响。
    酶储存液组成为:10mM Tris-HCl(pH8.0 at 25℃),50mM KCl,1mM DTT,0.1mM EDTA,0.2mg/ml BSA and 50% glycerol。
    1X Buffer Y组成为:33mM Tris-acetate(pH7.9 at 37℃),10mM magnesium acetate,66mM potassium acetate,0.1mg/ml BSA。
    酶切和连接效率:50倍过量的本内切酶消化1小时,>95%被酶切的片段可以被连接并被重新酶切(recut)。
    活性单位定义:在37℃,50微升反应体系中反应1小时,将1微克的λDNA完全分解的酶量定义为1个活性单位,即1U。
包装清单:

产品编号

产品名称

包装

D6489-1

NheI(10U/μl)

200U

D6010Y 

10X Buffer Y

1ml

说明书

1份

保存条件:
    -20℃保存。
注意事项:
    内切酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。
    如果发现预期的酶切位点不能切开,请确认是否存在甲基化干扰问题。
    特别注意:甘油含量大于5%,低盐浓度,pH >8.0或酶大大过量(约20倍以上)可能会导致星号活性,即产生非特异性酶切。
    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明

使用说明:
1. 单酶切时可以参考如下反应体系进行:

待酶切DNA

不超过1μg

双蒸水或MilliQ水

适量

10X Buffer Y

2μl

NheI

0.5-1μl

总体积

20μl

37℃孵育1小时或更长时间

    说明:请注意把Buffer和水等充分混匀后再加入内切酶,加入内切酶后可以用枪吹打或轻轻Vortex混
    匀。通常参考上述条件孵育1小时已经足够,但多孵育数小时甚至孵育过夜也不会产生负面影响。如果
    酶切较长时间甚至酶切过夜,可以使用更少量的酶。待酶切DNA量较大时,可以适当延长酶切时间或按
    比例放大酶切体系。
2. 双酶切或多酶切时,需选择适当的可以兼容两个或多个内切酶的缓冲液,然后参考上表设置反应体系。
   如果没有合适的缓冲液可以选择,可以在一种酶消化完毕后进行纯化,纯化完毕后再进行另外一种酶切
   反应。



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