产品简介:
产品编号 |
产品名称 |
产品包装 |
产品价格 |
D6581 |
PvuII |
1000U |
118.00元 |
PvuII内切酶为进口分装,基本信息如下:
识别序列 |
缓冲液兼容性(%) |
酶切温度 |
失活条件 |
甲基化干扰? |
CAG^CTG
GTC^GAC |
1X B |
1X G |
1X O |
1X R |
1X Y |
2X Y |
37℃ |
80℃
20min |
基本无干扰** |
50-100* |
100 |
20-50 |
50-100 |
20-50* |
20-50* |
*,Star activity,当酶量5倍或以上过量时会产生星号活性,即产生非特异性酶活性。
**,酶切效果是否受EcoBI methylase导致的DNA甲基化的影响未经测定,确定不受其它的常见甲基化修饰的影响。
酶储存液组成为:10mM Tris-HCl(pH7.4 at 25℃),100mM KCl,1mM DTT,1mM EDTA,0.2mg/ml BSA and 50% glycerol。
1X Buffer G组成为:10mM Tris-HCl(pH7.5 at 37℃),10mM MgCl2,50mM NaCl,0.1mg/ml BSA。
1X Buffer Y组成为:33mM Tris-acetate(pH7.9 at 37℃),10mM magnesium acetate,66mM potassium acetate,0.1mg/ml BSA。
酶切和连接效率:50倍过量的本内切酶消化1小时,>95%被酶切的片段可以被连接并被重新酶切(recut)。
活性单位定义:在37℃,50微升反应体系中反应1小时,将1微克的λDNA完全分解的酶量定义为1个活性单位,即1U。
包装清单:
产品编号 |
产品名称 |
包装 |
D6581-1 |
PvuII(10U/μl) |
1000U |
D6010G |
10X Buffer G |
1ml |
D6010Y |
10X Buffer Y |
1ml |
- |
说明书 |
1份 |
保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
内切酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。
如果发现预期的酶切位点不能切开,请确认是否存在甲基化干扰问题。
特别注意:15倍过量的PvuII可能导致星号活性,即产生非特异性酶活性。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
1. 单酶切时可以参考如下反应体系进行:
待酶切DNA |
不超过1μg |
双蒸水或MilliQ水 |
适量 |
10X Buffer G |
2μl |
PvuII |
0.5-1μl |
总体积 |
20μl |
37℃孵育1小时或更长时间 |
说明:请注意把Buffer和水等充分混匀后再加入内切酶,加入内切酶后可以用枪吹打或轻轻Vortex混
匀。通常参考上述条件孵育1小时已经足够,但多孵育数小时甚至孵育过夜也不会产生负面影响。如果
酶切较长时间甚至酶切过夜,可以使用更少量的酶。待酶切DNA量较大时,可以适当延长酶切时间或按
比例放大酶切体系。
2. 双酶切或多酶切时,需选择适当的可以兼容两个或多个内切酶的缓冲液,然后参考上表设置反应体系。
如果没有合适的缓冲液可以选择,可以在一种酶消化完毕后进行纯化,纯化完毕后再进行另外一种酶切
反应。