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400-1683301
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哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒

 产品编号: D0061
 产品包装: 50次
 产品价格: 162.00元
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产品简介

产品简介:

产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D0061 哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒 50次 162.00元

    碧云天生产的哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒(Mammalian genomic DNA extraction kit),采用了经典的蛋白酶K处理法,可以抽提到100-150kb以上的基因组DNA。
    用本试剂盒抽提到的基因组DNA适用于Southern杂交、基因组DNA的PCR扩增及基因组DNA文库的构建等。
    通常使用本试剂盒,从20毫克组织可以抽提到约40微克基因组DNA,从106-107Hela细胞可以抽提到约5-50微克基因组DNA。
    本试剂盒足够抽提50个常规量的样品。
包装清单:

产品编号

产品名称

包装

D0061-1

样品裂解液

30ml

D0061-2

蛋白酶K

130μl

D0061-3

10M 醋酸铵

6ml

D0061-4

Nuclease Free Water

6ml

说明书

1份

保存条件:
    -20℃保存,一年有效。10M醋酸铵和Nuclease Free Water也可以室温保存。
注意事项:
    需自备Tris平衡苯酚、氯仿和无水乙醇。
    如果打算抽提到大片段的基因组DNA,则要尽量避免基因组DNA的物理性剪切。例如避免剧烈振荡含有基因组DNA的样品,可以用剪掉枪头尖的枪头吸取含有基因组DNA的样品。
    不可过分干燥基因组DNA沉淀,否则会极难溶解。
    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明

使用说明:
1. 样品收集
   a) 对于组织样品:
      切下组织,并剪切成小块,置液氮中冻结,研碎或捣碎。
   b) 对于贴壁细胞:
      胰酶消化后,PBS或生理盐水洗一次,1000-2000g离心1-2分钟,弃上清,收集细胞。
   c) 对于悬浮细胞:
      1000-2000g离心1-2分钟,弃上清,收集细胞。
2. 基因组DNA抽提
   a) 样品处理完毕后,每1毫升样品裂解液中加入5微升蛋白酶K,混匀。
   b) 对于上述处理好的样品,每20毫克组织或106-107个细胞中加入500微升添加了蛋白酶K的样品裂解
      液,颠倒混匀数次,充分裂解组织或细胞。
   c) 50℃水浴消化过夜。
   d) 加入500微升Tris平衡苯酚抽提样品。
   e) 吸出酚相及中间相(可以吸除少量靠近中间相的水相液体),剩余的水相用等体积Tris平衡酚再抽
      提一次。
   f) 吸出酚相及中间相(可以吸除少量靠近中间相的水相液体),剩余的水相用等体积氯仿再抽提一
      次。
   g) 吸出约300微升上清液,加入60微升10M醋酸铵和600微升无水乙醇,颠倒数次混匀,此时可见DNA
      沉淀产生。
   h) 10,000g 离心1分钟,弃上清。加入70%乙醇洗涤DNA沉淀两次。
   i) 尽量吸除残余的乙醇,待看不到明显的液体时,立即加入50-100微升Nuclease Free Water溶解
      DNA。注意:不可过分干燥基因组DNA沉淀,否则会极难溶解。如果发现DNA沉淀难以溶解,可以
      在4℃用摇床缓慢摇动过夜,以溶解DNA沉淀。

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   Hdac1.

   Biochim Biophys Acta. 2009 Feb;1793(2):300-11.
2. Zhan X, Hu H, Ke C, Hu S, Wang D, Chen F.
   Isolation and characterization of eleven microsatellite loci in small abalone, Haliotis
   diversicolor Reeve.

   Conserv Genet (2009) 10:1185–1187.
3. Shi G, Zhang Z, Feng D, Xu Y, Lu Y, Wang J, Jiang J, Zhang Z, Li X, Ning G.
   Selection of reference genes for quantitative real-time reverse transcription-polymerase
   chain reaction in concanavalin A-induced hepatitis model.

   Anal Biochem. 2010 Jun 1;401(1):81-90. Epub 2010 Feb 11.
4. Yang W, Qin W, Hu Z, Suo Y, Zhao R, Ma X, Ma W, Wang T, Liang J, Tian J, Wang J
   Comparison of Cerenkov Luminescence Imaging (CLI) and gamma camera imaging forvisualization
   of let-7 expression in lung adenocarcinoma A549 Cells.

   Nucl Med Biol. 2012 Jun 29.
5. Li L, Cao W, Zheng W, Fan C, Chen T.
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   Dalton Trans. 2012 Nov 7;41(41):12766-72. doi: 10.1039/c2dt30665d.
6. Sun Y, Mu F, Li C, Wang W, Luo M, Fu Y, Zu Y.
   Aspidin BB,a phloroglucinol derivative, induces cell cycle arrest and apoptosis in human
   ovarian HO-8910 cells.

   Chem Biol Interact. 2013 Jul 5;204(2):88-97. doi: 10.1016/j.cbi.2013.04.008.
   Epub 2013 Apr 27.
7. Wang J, Yuan L, Xiao H, Xiao C, Wang Y, Liu X.
   Momordin Ic induces HepG2 cell apoptosis through MAPK and PI3K/Akt-mediated mitochondrial
   pathways.

   Apoptosis. 2013 Jun;18(6):751-65. doi: 10.1007/s10495-013-0820-z.
8. Luo Z, Yu L, Yang F, Zhao Z, Yu B, Lai H, Wong KH, Ngai SM, Zheng W, Chen T.
   Ruthenium polypyridyl complexes as inducer of ROS-mediated apoptosis in cancer cells by
   targeting thioredoxin reductase.

   Metallomics. 2014 Aug;6(8):1480-90. doi: 10.1039/c4mt00044g.




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