使用说明：
1. 涂平板：
   为取得最佳的感受态效率，必须先把甘油菌或其它形式保存的菌种涂LB平板，并培养过夜。
2. 接种：
   取一有新鲜培养的菌种的LB平板，后续操作均在超净台内进行。把镊子的顶端在70%酒精中蘸一下，
   并在酒精灯上略略烧一下，使镊子的顶端处于无菌状态。用镊子夹取一个无菌的塑料枪头或牙签，从
   平板上挑取一个单克隆，然后把蘸有菌种的塑料枪头或牙签放到装有3毫升LB的细菌培养试管内。上
   述操作也可以使用接种环等进行操作。
3. 培养：
   37℃约200rpm培养过夜，通常培养时间控制在16小时左右为宜。绝对不宜超过18小时。
4. 再接种培养：
   根据需要制备的感受态细菌的量，按照1:100的比例用新鲜培养的过夜菌接种培养。例如取500微升的
   新鲜过夜菌到50毫升的LB中继续37℃约200rpm培养。通常在大约培养2-2.5小时后OD₆₀₀可以达到0.3-
   0.5。
5. 制备感受态细菌：
   在培养的细菌OD₆₀₀达到0.3-0.5时，4℃2000g离心5分钟收集细菌。 如果离心沉淀前的菌量为50毫
   升，按后续操作进行，如果是其它体积则按比例换算后进行后续操作。用5毫升预冷的LB重新悬浮起
   细菌沉淀，加入5毫升在冰浴或冰水浴上融解的感受态制备试剂，混匀，冰浴放置5分钟。然后再轻轻
   混匀，根据实验需要适当分装到1.5毫升或0.5毫升的离心管内后-70℃保存。
   注：如果以后会只做单管的转化，可以分装成每管最少50微升或100微升，如果以后一次性做多个转
   化，可以每管分装500微升或更大体积。-70℃保存后，感受态的效率会随时间的推移逐渐下降，但通
   常在半年内使用转化效率下降不会太多。总的来说，新鲜制备的感受态要比冻存的感受态转化效率更
   高一些。
6. 感受态细菌的使用：
   (1) 对于感受态细菌效率的测定或连接产物的转化(其它如基因突变产物的转化等参考连接产物进
       行)：
   a) 在冰上缓慢融解感受态细菌(对于新鲜制备的感受态就可以直接使用了)，如果检测感受态细菌的
      效率，加入100pg-10ng质粒，但质粒的体积不宜超过感受态细菌量的10%。如果转化连接产物，每
      100微升感受态细菌加入10微升连接产物。
   b) 轻轻用手指弹动离心管，以混匀细菌和质粒或连接产物。冰浴或冰水浴放置30分钟。
   c) 42℃水浴，热休克2分钟。
   d) 热休克后立即置于冰水浴中，2分钟。
   e) 加入900微升LB，37℃200rpm培养1小时。
   f) 如果检测感受态效率，取100微升涂布到含有相应抗生素的LB平板上。如果转化的是连接产物，
      2000-3000g离心1分钟或更长时间使细菌充分沉淀下来。去除约900-950微升LB培养液。细菌沉淀
      用余下的LB培养液重悬，然后全部涂布到含有适当抗生素的LB平板上。37℃培养过夜。
   (2) 对于质粒的转化：
   a) 融解感受态细菌，加入不少于50ng质粒到50或100微升感受态细菌中。质粒的量可以是1微克或更
      多，但体积不宜超过感受态细菌量的10%。
   b) 轻轻用手指弹动离心管，以混匀细菌和质粒。冰浴或冰水浴放置10分钟。
   c) 取全部菌液直接涂布到含有适当抗生素的LB平板上，37℃培养过夜。