P0015A SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X)/P0015A SDS-PAGE Sample Loading Buffer(1X)

产品简介

产品简介：

产品编号	产品名称	产品包装	产品价格
P0015A	SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X)	10ml	32.00元

　　SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(SDS-PAGE Sample Loading Buffer，1X)，是一种经过改良的以溴酚蓝为染料的蛋白上样缓冲液。
　　可以直接用于细胞或组织样品的裂解，并用于后续常规的SDS-PAGE蛋白样品的上样。使用SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X)直接裂解蛋白样品的优点是比较便捷；缺点是裂解好的蛋白样品不能用常规的Bradford法或BCA法测定蛋白浓度。这样蛋白上样量的均一性就较难控制，需要借助考马斯亮蓝等的染色结果或Western的检测结果，来调整上样量。当细胞量或组织用量能控制得比较均一时，使用本裂解液直接裂解获取蛋白样品会比较便捷。
　　本产品也可以用于SDS-PAGE时待上样蛋白样品的稀释等。
包装清单：

产品编号	产品名称	包装
P0015A	SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X)	10ml
—	说明书	1份

保存条件：
-20℃保存，至少一年有效。
注意事项：
　　SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X)中含少量DTT，有轻微刺激性气味，但不含剧毒的巯基乙醇。
　　SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X)必须完全溶解后再使用。
　　为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明

使用说明：

1.	在室温或不超过37℃的水浴中溶解SDS-PAGE上样缓冲液(1X)。水浴溶解后立即室温存放，尽量避免长时间置于水浴中。
2.	对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升SDS-PAGE上样缓冲液(1X)的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使SDS-PAGE上样缓冲液(1X)和细胞充分接触。通常SDS-PAGE上样缓冲液(1X)接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。裂解后的样品收集到一洁净离心管内。
3.	对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250微升SDS-PAGE上样缓冲液(1X)的比例加入SDS-PAGE上样缓冲液(1X)。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再进行裂解。
4.	对于组织样品： a. 把组织剪切成细小的碎片。 b. 按照每20毫克组织加入150-250微升SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X)的比例加入SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X)。(如果裂解不充分可以适当添加更多的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X)，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X)的用量。) c. 用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。 d. 充分裂解后，将样品收集到一洁净离心管内。说明：如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
5.	100℃或沸水浴加热5-10分钟，以充分变性蛋白。说明：煮沸前通常会发现蛋白样品内有粘稠的半透明状物体，通常在本上样缓冲液内沸水浴煮沸8-10分钟后可以确保该粘稠的半透明状物体消失，以便于后续的上样操作。
6.	冷却到室温后，室温稍离心一下以沉淀可能出现的杂质等，上清即可直接上样到SDS-PAGE胶加样孔内即可。通常电泳至蓝色染料到达胶的底端处附近即可停止电泳。

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使用本产品的文献：
1. Xie Y, Hao H, Kang A, Liang Y, Xie T, Sun S, Dai C, Zheng X, Xie L, Li J, Wang G.
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4. Lu B, Shao L, Feng S, Wang T, Zhong Y.
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   Sci China Life Sci. 2014 Jan;57(1):46-51. doi: 10.1007/s11427-013-4595-9. Epub 2014 Jan
   9.

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