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考马斯亮蓝染色试剂盒(常规法)

 产品编号: P0017A
 产品包装: 1盒
 产品价格: 118.00元
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产品简介

产品简介:

产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
P0017A 考马斯亮蓝染色试剂盒(常规法) 1盒 118.00元

    本考马斯亮蓝染色试剂盒(Coomassie Blue Staining Kit)采用了最经典的考马斯亮蓝染色和脱色方法,以考马斯亮蓝R250为染料,可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白电泳凝胶的常规染色和脱色,或Western转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测。
    使用本试剂盒,采用常规染色脱色方法累计时间达到2-3小时后可以观察到蛋白条带;采用快速染色脱色方法20分钟左右即可观察到蛋白条带。观察到最清晰的蛋白条带则需染色脱色更长时间。
    本试剂盒中的染色液和脱色液经过改良,不含有毒的甲醇,但含有刺激性气味的乙酸。
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
P0017A-1 考马斯亮蓝染色液 100ml
P0017A-2 考马斯亮蓝染色脱色液 500ml
说明书 1份

保存条件:
    室温保存,至少一年有效。
注意事项:
    可以使用枪头盒或适当大小的培养皿作为染色和脱色的容器。
    本染色液和脱色液呈酸性,有轻微腐蚀性,使用时请作必要防护。
    本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明

使用说明:
1. 常规染色脱色方法:
   a. 电泳结束后,取凝胶放入适量考马斯亮蓝染色液中,确保染色液可以充分覆盖凝胶。
   b. 置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动,室温染色1小时或更长时间。
      注:具体的染色时间取决于凝胶的厚度和染色时的温度。凝胶较厚,温度较低,则染色时间宜适
      当延长。凝胶较薄,温度较高,则染色时间可以适当缩短。通常染色至凝胶的颜色和染色液的颜
      色非常接近,在染色液中几乎看不清凝胶时,可以认为已染色充分。染色2-4个小时或更长时间不
      会对最终的染色效果产生负面影响。
   c. 倒出染色液。染色液可以回收重复使用至少2-3次。
   d. 加入适量考马斯亮蓝染色脱色液,确保脱色液可以充分覆盖凝胶。
   e. 置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动,室温脱色4-24小时。期间更换脱色液2-4次,直至蓝色背景
      基本上全部被脱去,并且蛋白条带染色效果达到预期。通常蛋白条带在脱色1-2小时后即可出现。
      注:脱色期间可以在脱色液中加入一片吸水纸,可以使部分染料吸附在吸水纸上,加快脱色。脱
      色时间过长也会导致蛋白条带的颜色变浅。
   f. 完成脱色后,可以把凝胶保存在水中,用于后续的拍照等。保存在水中的凝胶会发生溶涨。如需
      避免溶涨,可以把胶保存在含20%甘油的水中。长期保存可以制备干胶。
2. 快速染色脱色方法:
   a. 电泳结束后,取胶放入适量考马斯亮蓝染色液中,微波炉加热至接近沸腾或刚刚沸腾,立即停止
      加热。
      通常对于胶浓度大于10%的胶比较坚韧,在发生煮沸时不易破损;对于胶浓度小于10%的胶,宜尽
      量避免煮沸,以免出现胶碎裂的情况。
   b. 随后在染色液温度较高的情况下,在室温摇床上摇动5-10分钟。
   c. 倒出染色液。染色液可以回收重复使用至少2-3次。
   d. 加入适量考马斯亮蓝染色脱色液,确保染色液可以充分覆盖凝胶。
   e. 微波炉加热至接近沸腾或刚刚沸腾,立即停止加热。
   f. 随后在脱色液温度较高的情况下,在摇床上摇动5-10分钟。此时通常可以观察到比较清楚的蛋白
      条带。
   g. 更换新鲜的脱色液,重复步骤e和步骤f,直至蓝色背景基本上全部被脱去,蛋白条带染色效果达
      到预期。
   h. 完成脱色后,可以把凝胶保存在水中,用于后续的拍照等。保存在水中的凝胶会发生溶涨。如需
      避免溶涨,可以把胶保存在含20%甘油的水中。长期保存可以制备干胶。

常见问题:
1. 常规染色脱色方法和快速染色脱色方法的优缺点?
   常规染色脱色方法耗时较长,但检测灵敏度更高,染色效果更加稳定。快速染色脱色方法通常检测灵
   敏度略低,并且在微波炉加热的过程中有时会出现暴沸导致凝胶碎裂的情况,需特别注意。另外微波
   炉加热导致的高温会引起染色液和脱色液中的乙酸的挥发,最好能在通风橱中进行。

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   J Bacteriol. 2009 Nov;191(21):6473-81.
2. Xiang D, Zhang J, Chen Y, Guo Y, Schalow A, Zhang Z, Hu X, Yu H, Zhao M, Zhu S, Lu H, Wu M,
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   coli.

   Protein Expr Purif. 2010 Feb;69(2):153-8.
3. Liu WX, Hu S, Qiao ZJ, Chen WY, Liu LT, Wang FK, Hua RH, Bu ZG, Li XR.
   Expression, purification, and improved antigenic specificity of a truncated recombinant
   bp26protein of Brucella melitensis M5-90: a potential antigen for differential
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   Biotechnol Appl Biochem. 2011 Jan-Feb;58(1):32-8.
4.Li G, Hu Z, Yin H, Zhang Y, Huang X, Wang S, Li W.
   A novel dendritic nanocarrier of polyamidoamine-polyethylene glycol-cyclic RGD for "smart"
   small interfering RNA delivery and in vitro antitumor effects by human ether-à-go-
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   Int J Nanomedicine. 2013;8:1293-306. doi: 10.2147/IJN.S41555. Epub 2013 Mar 27.
5.Wang F, Wang L, Xu Z, Liang G.
   Identification and analysis of multi-protein complexes in placenta.
   PLoS One. 2013 Apr 29;8(4):e62988. doi: 10.1371/journal.pone.0062988. Print 2013.




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