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| 产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
| D2916-1μg | pET-N-GST-PreScission | 1μg | 888.00元 |
| D2916-100μg | pET-N-GST-PreScission | 100μg | 1169.00元 |
pET-N-GST-PreScission是一种用于表达N端含有GST标签(Glutathione S-transferase tag, GST tag)的目的蛋白的原核表达质粒。本质粒N端GST标签后含有PreScission酶切位点，可通过PreScission Protease (P2302/P2303)切除N端的GST标签。本质粒为卡那霉素抗性。
本质粒含有T7启动子/lac操纵子，可以在异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)的诱导下高效启动目的蛋白表达。在多克隆位点的前面有一个GST标签的编码序列。因此在多克隆位点根据读码框插入目的基因就可以表达N端含有GST标签的目的蛋白。
本载体在N端GST标签与多克隆位点之间含有PreScission蛋白酶识别的八肽序列LEVLFQGP，对应的核酸序列为CTGGAAGTTCTGTTCCAGGGGCCC，因此在目的蛋白纯化后可以利用PreScission Protease切除N端的GST标签。PreScission蛋白酶酶切发生在八肽序列的Q和G之间，因此在酶切去除GST标签的时候目的蛋白的N端留下两个额外的氨基酸残基GP。
通常可以采用如BeyoGold™ GST-tag Purification Resin (P2251/P2253/P2255)和GST标签蛋白纯化试剂盒(P2262)等纯化本质粒表达的目的蛋白，也可以使用GST抗体(AG768/AF0174)检测和少量地分离纯化目的蛋白。
pET-N-GST-PreScission质粒的主要信息如下：
| Feature Nucleotide | Position |
| f1 origin | 12-467 |
| Kanamycin resistance ORF | 563-1645 |
| PBR 322 origin | 2084 |
| LacI coding sequence | 3518-4597 |
| T7 promoter | 4988-5004 |
| GST tag coding sequence | 5076-5732 |
| PreScission recognition site sequence | 5733-5756 |
| Multiple cloning site(BamHI-XhoI) | 5757-5804 |
| T7 Terminator | 5872-5918 |
pET-N-GST-PreScission质粒(5943bp)的图谱如下：
pET-N-GST-PreScission质粒的详细图谱见说明书：https://www.beyotime.com/Manual/D2916 pET-N-GST-Precission.pdf。
pET-N-GST-PreScission中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pET-N-GST-PreScission)包括：
| AatII | Acc65I | AflII | AgeI | AhdI | AleI | AscI |
| AvrII | BaeI | BbvCI | BfuAI | BmgBI | BmtI | BsaI |
| BseRI | BsiWI | BspMI | BsrGI | Bsu36I | CspCI | EagI |
| Eco53kI | FseI | KpnI | MfeI | NcoI | NheI | NotI |
| PacI | PmeI | PmlI | PspXI | RsrII | SacI | SacII |
| SbfI | SexAI | SfiI | SnaBI | SpeI | SrfI | StuI |
| ZraI | ||||||
pET-N-GST-PreScission中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pET-N-GST-PreScission once)包括：
| DraIII | CAC,NNN`GTG | 242 | MluI | A`CGCG,T | 4242 |
| PsiI | TTA|TAA | 370 | BstAPI | GCAN,NNN`NTGC | 4563 |
| PvuI | CG,AT`CG | 943 | SphI | G,CATG`C | 4771 |
| AsiSI | GCG,AT`CGC | 943 | SgrAI | CR`CCGG,YG | 4923 |
| SmaI | CCC|GGG | 1067 | XbaI | T`CTAG,A | 5034 |
| XmaI | C`CCGG,G | 1067 | NdeI | CA`TA,TG | 5074 |
| TspMI | C`CCGG,G | 1069 | MscI | TGG|CCA | 5286 |
| NruI | TCG|CGA | 1286 | BstBI | TT`CG,AA | 5476 |
| AcuI | CTGAAG(N)14,NN` | 1597 | SwaI | ATTT|AAAT | 5506 |
| AlwNI | CAG,NNN`CTG | 1729 | ScaI | AGT|ACT | 5652 |
| BssSI | C`ACGA,G | 1968 | BamHI | G`GATC,C | 5757 |
| BstZ17I | GTA|TAC | 2374 | HindIII | A`AGCT,T | 5763 |
| Tth111I | GACN`N,NGTC | 2399 | PstI | C,TGCA`G | 5769 |
| PflFI | GACN`N,NGTC | 2399 | EcoRI | G`AATT,C | 5775 |
| PpuMI | RG`GWC,CY | 3136 | EcoRV | GAT|ATC | 5783 |
| FspI | TGC|GCA | 3164 | SalI | G`TCGA,C | 5787 |
| BglI | GCCN,NNN`NGGC | 3182 | BglII | A`GATC,T | 5793 |
| PshAI | GACNN|NNGTC | 3401 | XhoI | C`TCGA,G | 5799 |
| HpaI | GTT|AAC | 3740 | PaeR7I | C`TCGA,G | 5799 |
| BssHII | G`CGCG,C | 3831 | BlpI | GC`TNA,GC | 5860 |
| NmeAIII | GCCGAG(N)19,NN` | 4041 | StyI | C`CWWG,G | 5882 |
| BstEII | G`GTNAC,C | 4060 | |||
pET-N-GST-PreScission质粒中推荐使用的测序引物序列如下：
pET-F primer (5619-5638): 5′- AAACGTATTGAAGCTATCCC-3′
pET-R primer (5857-5876): 5′-TGCTAGTTATTGCTCAGCGG-3′
pET-N-GST-PreScission的全序列信息：D2916 pET-N-GST-PreScission.txt。
不同原核表达质粒的比较和选择，以及标签、蛋白酶切位点和蛋白共表达的考虑可以参考如下网页：
http://www.beyotime.com/support/prokaryotic-plasmids.htm
包装清单：
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| D2916-1μg | pET-N-GST-PreScission | 1μg |
| D2916-100μg | pET-N-GST-PreScission | 100μg |
| — | 说明书 | 1份 |
保存条件：
-20℃保存。
注意事项：
本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：
1. 首次使用1μg包装的本产品时，请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
2. 100μg包装的本产品质粒浓度为0.1μg/μl，共1ml。可以直接用于酶切或者转染细胞。
3. pET-N-GST-PreScission质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因，构建的质粒可以用常规方法转入表达菌株。
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