中文 | English
订货电话
400-1683301
800-8283301
电话订货时间:
工作日9:00-17:00
订货邮件
order@beyotime.com
订货QQ
4001683301
微信在线咨询
订单下载
碧云天订单.xls
核酸相关> 菌种与质粒> 原核载体
pT7-N-His-SUMO-WELQ
产品编号: D5010-1μg
产品包装:1μg
选择包装
价格: ¥ 888.00
产品简介
使用说明
产品文件
相关产品
相关论文
产品问答
产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D5010-1μg pT7-N-His-SUMO-WELQ 1μg 888.00元
D5010-100μg pT7-N-His-SUMO-WELQ 100μg 1169.00元

pT7-N-His-SUMO-WELQ是碧云天研发的一种用于表达N端同时含有His标签(His tag)和SUMO标签(SUMO tag)双标签的目的蛋白的原核表达质粒。His标签有利于通过亲和层析方法进行目的蛋白的纯化,而SUMO标签则有利于改善目的蛋白的折叠,增加目的蛋白可溶性和产量。表达后的含有目的蛋白的融合蛋白可以通过PreScission Protease (P2302/P2303)酶切去除His标签但保留SUMO标签,也可以通过WELQ Protease (P2311)酶切去除N端的His和SUMO两个标签。

本质粒含有T7启动/lac操纵子,可以在异丙基硫代半乳糖苷(IPTG) (ST098/ST1416)的诱导下高效启动目的蛋白表达。在多克隆位点根据读码框插入目的基因就可以表达N端含有His和SUMO双标签的目的蛋白。

本质粒在N端SUMO标签后含有WELQ Protease识别的四肽序列W-E-L-Q↓X (Trp-Glu-Leu-Gln↓X,X为任意氨基酸),该识别位点上含有Pst Ⅰ酶切位点,便于构建不含有额外氨基酸的融合蛋白。因此,可以利用WELQ Protease酶切除去目的蛋白N端的His标签和SUMO标签,且目的蛋白N端不会保留额外的氨基酸[1]。

可以采用如BeyoGold™ His-tag Purification Resin (P2210/P2218/P2220)/His标签蛋白纯化试剂盒(耐还原螯合型) (P2226)以及BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐变性剂型) (P2233)/His标签蛋白纯化试剂盒(耐变性剂型) (P2229)等纯化本质粒表达的目的蛋白,也可以使用His-tag抗体(AH367)检测或少量分离纯化目的蛋白。

本质粒为卡那霉素抗性。

pT7-N-His-SUMO-WELQ质粒(5637bp)的图谱如下:

pT7-N-His-SUMO-WELQ质粒的主要信息如下:

Feature Nucleotide Position
f1 origin 12-467
Kanamycin resistance ORF 560-1375
PBR322 origin 1497-2085
LacI coding sequence 3515-4597
LacI promoter 4598-4675
T7 promoter 4988-5004
lac operator 5007-5031
RBS 5046-5068
His tag coding sequence 5088-5105
PreScission recognition site sequence   5115-5138
SUMO tag coding sequence 5151-5444
WELQ site 5454-5465
Multiple cloning site (PstI-XhoI) 5460-5498
T7 Terminator 5565-5612

pT7-N-His-SUMO-WELQ的多克隆位点的详细图谱见说明书:https://www.beyotime.com/Manual/D5010 pT7-N-His-SUMO-WELQ.pdf

pT7-N-His-SUMO-WELQ中没有的酶切位点包括:

AarI AatII AbsI Acc65I AgeI AhdI AscI
AvrII BaeI BbvCI BfuAI BmgBI BplI BsaI
BseRI BsiWI BspMI BsrGI BstBI Bsu36I CspCI
EcoRV FalI FseI I-CeuI I-PpoI I-SceI KflI
KpnI MauBI MfeI MreI MscI NcoI PacI
PasI PI-PspI PI-SceI PmeI PmlI PsrI RsrII
SacII SalI SbfI ScaI SexAI SfiI SgrDI
SnaBI SpeI SrfI StuI SwaI ZraI

pT7-N-His-SUMO-WELQ中的单酶切位点包括:

AccI GT`MK,AC 2373 NheI G`CTAG,C 5145
AflII C`TTAA,G 5336 NmeAIII GCCGAG(N)19,NN` 4042
AleI CACNN|NNGTG 5495 NotI GC`GGCC,GC 5485
AlwNI GAG,NNN`CTG 1732 NruI TCG|CGA 1286
AsiSI GCG,AT`CGC 945 PaeR7I C`TCGA,G 5493
BamHI G`GATC,C 5442 PciI A`CATG,T 2141
Bg1I GCCN,NNN`NGGC 3182 PflFI GACN`N,NGTC 2399
Bg1II A`GATC,T 5251 PpuMI RG`GWC,CY 3136
BmtI G,CTAG`C 5149 PshAI GACNN|NNGTC 3401
BspQI GCTCTTCN`NNN, 2258 PsiI TTA|TAA 370
BssHII G`CGCG,C 3831 PspXI VC`TCGA,GB 5493
BssSaI C`ACGA,G 1968 PstI C,TGCA`G 5464
BstAPI GCAN,NNN`NTGC 4566 PvuI CG,AT`CG 945
BstEII G`GTNAC,C 4060 SacI G,AGCT`C 5476
BstZ17I GTA|TAC 2374 SapI GCTCTTCN`NNN, 2258
DraI TTT|AAA 5227 SgrAI CR`CCGG,YG 4923
DraIII CAC,NNN`GTG 245 SmaI CCC|GGG 1069
EagI C`GGCC,G 5485 SphI G,CATG`C 4775
Eco53kI GAG|CTC 5474 StyI C`CWWG,G 5576
EcoRI G`AATT,C 5466 TatI W`GTAC,W 2337
FspI TGC|GCA 3164 TspMI C`CCGG,G 1067
FspAI RTGC|GCAY 3164 Tth111I GACN`N,NGTC 2399
HincII GTY|RAC 3740 XbaI T`CTAG,A 5034
HindIII A`AGCT,T 5478 XhoI C`TCGA,G 5493
HpaI GTT|AAC 3740 XmaI C`CCGG,G 1067
MluI A`CGCG,T 4242

pT7-N-His-WELQ质粒中推荐使用的测序引物序列如下:

Forward primer (4988-5004): 5'-TAATACGACTCACTATA-3'

Reverse primer (5551-5570): 5'-TGCTAGTTATTGCTCAGCGG-3'

pT7-N-His-SUMO-WELQ的全序列信息:D5010 pT7-N-His-SUMO-WELQ序列.txt

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
D5010-1μg pT7-N-His-SUMO-WELQ 1μg
D5010-100μg pT7-N-His-SUMO-WELQ 100μg
说明书 1份
保存条件:

-20℃保存。

注意事项:

本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1.首次使用1µg包装的本产品时,请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2.100µg包装的本产品质粒浓度为0.1µg/µl,共1ml。可以直接用于酶切及转化,在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,构建的质粒可以用常规方法转入表达菌株。
相关产品:
产品编号 产品名称 包装
AH367 His-tag抗体 >20次
D2902-1μg pET-N-His-C-His 1μg
D2902-100μg pET-N-His-C-His 100μg
D2905-1μg pET-N-His-TEV 1μg
D2905-100μg pET-N-His-TEV 100μg
D2908-1μg pET-N-His-Thrombin-C-His 1μg
D2908-100μg pET-N-His-Thrombin-C-His 100μg
D2911-1μg pET-N-GST-Thrombin-C-His 1μg
D2911-100μg pET-N-GST-Thrombin-C-His 100μg
D2916-1μg pET-N-GST-PreScission 1μg
D2916-100μg pET-N-GST-PreScission 100μg
D2918-1μg pET-N-His-PreScission-SUMO 1μg
D2918-100μg pET-N-His-PreScission-SUMO 100μg
D2931-1μg pET-Dual-N-GST 1μg
D2931-100μg pET-Dual-N-GST 100μg
D2933-1μg pET-Dual-N-GST-PreScission 1μg
D2933-100μg pET-Dual-N-GST-PreScission 100μg
D5002-1μg pTac-His-MBP-WELQ (原核活性蛋白高表达质粒) 1μg 
D5002-100μg pTac-His-MBP-WELQ (原核活性蛋白高表达质粒) 100μg 
D5005-1μg pTac-GST-WELQ 1μg
D5005-100μg pTac-GST-WELQ 100μg
D5008-1μg pT7-N-His-WELQ 1μg
D5008-100μg pT7-N-His-WELQ 100μg
D5010-1μg pT7-N-His-PSP-SUMO-WELQ 1μg
D5010-100μg pT7-N-His-PSP-SUMO-WELQ 100μg
P2210 BeyoGold™ His-tag Purification Resin 10ml
P2218 BeyoGold™ His-tag Purification Resin 100ml
P2220 BeyoGold™ His-tag Purification Resin 1000ml
P2226 His标签蛋白纯化试剂盒 10ml
P2302 PreScission Protease 100U
P2303 PreScission Protease 500U
P2311S WELQ Protease 500U
P2311M WELQ Protease 2500U
P2311L WELQ Protease 10kU
物质安全数据单
输入右侧验证码点击下载:
更换校验码
质检证书
输入批号搜寻COA
搜索
相关产品请点击如下按钮:
使用本产品的文献:
购物车
会员
顶部