微信在线咨询
| 产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
| D7190S | BeyoRT™ Q cDNA第一链合成试剂盒 | 20次 | 83.00元 |
| D7190M | BeyoRT™ Q cDNA第一链合成试剂盒 | 100次 | 309.00元 |
| D7190L | BeyoRT™ Q cDNA第一链合成试剂盒 | 500次 | 1272.00元 |
碧云天生产的BeyoRT™ Q cDNA第一链合成试剂盒，即BeyoRT™ Q First Strand cDNA Synthesis Kit，是一种采用了经过改造和优化特别适合定量PCR(quantitative PCR, qPCR)的高精确度的BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶，可以用于以总RNA、mRNA等为模板反转录合成cDNA第一链的试剂盒。本试剂盒包含了进行cDNA第一链合成所需的各种试剂。
使用本试剂盒合成的第一链，可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR也称定量PCR(quantitative PCR, qPCR)、cDNA的第二链合成以及cDNA文库的构建，尤其是逆转录所得目的基因的克隆等。
本试剂盒中使用的BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶是最常用的优质反转录酶之一，广泛用于获得总RNA或mRNA后cDNA第一条链的合成，特别适合用于qPCR和一步法的qRT-PCR，本产品的反转录产物也适合用于常规的PCR、cDNA的第二链合成以及cDNA文库的构建，以及逆转录所得目的基因的克隆等。使用BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶对总RNA进行反转录，之后以不同稀释倍数的cDNA为模板，通过qPCR检测目的基因的结果请参考图1。
图1.BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶对总RNA进行反转录后用于qPCR检测的效果图。从HEK293T细胞抽提获得的总RNA 2µg，在20μl反转录体系中进行反转录，反转录后取1μl (100%)或不同稀释比例(1μl的10%、1%、0.1%、0.01%)反转录产物进行GAPDH cDNA 151bp目的片段的qPCR扩增和电泳检测。A. 扩增曲线图。B. 溶解曲线图。C. qPCR扩增产物的电泳图。NTC (no-template control)，用水代替反转录产物。qPCR反应体系20µl，使用碧云天生产的D7260 BeyoFast™ SYBR Green qPCR Mix (2X)。实际检测效果会和特定实验条件有关，图中结果仅供参考。
使用本试剂盒也可以轻松完成长度为8 kb以下基因的反转录(参考图2)，反转录的最大长度可以达到12 kb。
图2.使用本试剂盒对总RNA反转录后，对于不同长度的cDNA进行PCR扩增后的电泳效果图。图中可见对于0.2-12kb的cDNA可以非常高效地被反转录。实际反转录特定目的基因片段后，PCR扩增较大片段时可能需要适当优化引物和PCR扩增条件，图中的扩增效果仅供参考。
本试剂盒提供了RNase Inhibitor，确保在反转录过程中的RNA不会被RNA酶所降解并取得良好的反转录效果。
本试剂盒还提供了Oligo(dT)18和random hexamer这两种引物，前者适合用于带有Poly(A)尾的mRNA的反转录，后者适合用于任何RNA的反转录。也可以自行采用基因特异性引物进行cDNA第一链的合成。
失活或抑制：80℃孵育10min可以导致本产品中的BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶失活；EDTA、EGTA等螯合剂、无机磷酸盐或焦磷酸盐以及聚氨(polyamine)对BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶有抑制作用。
用于体积为20微升的cDNA第一链合成反应时，不同包装的本试剂盒足够分别进行20个、100个和500个cDNA第一链样品的合成。
关于碧云天不同反转录酶的比较和选择，可参考相关网页：http://www.beyotime.com/support/reversetranscriptase.htm
包装清单：| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| D7190S-1 | BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶 | 20μl |
| D7190S-2 | Reaction Buffer(5X) | 0.1ml |
| D7190S-3 | RNase Inhibitor (20U/μl) | 20μl |
| D7190S-4 | dNTP Mix (10 mM each) | 40μl |
| D7190S-5 | Oligo(dT)18 Primer (0.5μg/μl) | 20μl |
| D7190S-6 | Random Hexamer Primer (0.2μg/μl) | 20μl |
| D7190S-7 | DEPC-treated Water | 0.3ml |
| — | 说明书 | 1份 |
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| D7190M-1 | BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶 | 100μl |
| D7190M-2 | Reaction Buffer(5X) | 0.5ml |
| D7190M-3 | RNase Inhibitor (20U/μl) | 100μl |
| D7190M-4 | dNTP Mix (10 mM each) | 200μl |
| D7190M-5 | Oligo(dT)18 Primer (0.5μg/μl) | 100μl |
| D7190M-6 | Random Hexamer Primer (0.2μg/μl) | 100μl |
| D7190M-7 | DEPC-treated Water | 1.5ml |
| — | 说明书 | 1份 |
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| D7190L-1 | BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶 | 500μl |
| D7190L-2 | Reaction Buffer(5X) | 2.5ml |
| D7190L-3 | RNase Inhibitor (20U/μl) | 500μl |
| D7190L-4 | dNTP Mix (10 mM each) | 1ml |
| D7190L-5 | Oligo(dT)18 Primer (0.5μg/μl) | 500μl |
| D7190L-6 | Random Hexamer Primer (0.2μg/μl) | 500μl |
| D7190L-7 | DEPC-treated Water | 7.5ml |
| — | 说明书 | 1份 |
-20℃保存。
注意事项：对于GC含量比较高的RNA的反转录，产品的使用说明中给予了特别说明，请予以关注。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
| 模板(右侧3种任选其中一种) | Total RNA | 0.1ng-5μg |
| 或poly(A) RNA/mRNA | 10pg-0.5μg | |
| 或specific RNA | 0.01pg-0.5μg | |
| 引物(右侧3种任选其中一种) | Oligo(dT)18 primer | 1 μl |
| 或Random Hexamer primer | 1 μl | |
| 或gene-specific primer | 15-25pmol | |
| DEPC-treated Water | - | To 12μl* |
| 选择性步骤：如果模板RNA的GC含量较高(例如大于55%)或者有比较严重的二级结构，混匀后微离心以把液体沉降至管底，65℃孵育5min，随后立即置于冰上冷却，以打开RNA中一些比较稳定的二级结构。 | ||
| Reaction Buffer (5X) | - | 4μl |
| RNase Inhibitor (20U/μl) | - | 1μl |
| dNTP Mix (10mM each) | - | 2μl |
| BeyoRT™ QM-MLV反转录酶 | - | 1μl |
| 总体积 | 20μl | |
微信在线咨询
