使用说明：
1 .细胞培养(以六孔板为例，其它培养板或培养皿参考六孔板进行操作)：
   在转染前一天(20-24小时)把约20-60万细胞(具体的细胞数量据细胞大小和细胞生长速度而定)

   培养到六孔板内，使第二天细胞能达到约70-80%满。
2. 在进行下述转染步骤前，把六孔板每孔内换成新鲜的细胞培养液。培养液的体积约为2ml左右，

   可以含有血清和抗生素。
3. 把Lipotap脂质体转染试剂轻轻混匀。
4. 参考下表，对于待转染的六孔板中一个孔的细胞，在一洁净无菌离心管内依次加入适量不含抗

   生素和glutamine的DMEM溶液，15μl Lipotap，及2.5μg DNA，使最终体积为75μl，用枪轻轻

   吹打混匀。注意：不可Vortex或离心。

   注1：对于六孔板中一个孔的细胞，Lipotap的用量可以在8-20μl内进行适当调节，DNA用量可以

    在1-4μg的范围内进行适当调节。最佳的转染条件，因具体的细胞和培养条件而定，可以在上述

　　推荐范围内自行优化转染条件。对于多个孔转染相同数量相同质粒的情况可以把每个孔所需

    的Lipofecter和DNA混合物配置在一个离心管内，后续混匀孵育等步骤后可以分加到各个孔内。
   注2：对于其它培养板或培养器皿，各种试剂的用量可以参考上表按照细胞培养面积按比例进行

    换算。如果转染RNA或寡核苷酸等可以参考转染DNA的条件进行。
   注3：转染siRNA或其它类似的数十个碱基对双链核酸可以参考下表进行：

5. 15-25℃孵育10-15分钟。有可能出现絮状沉淀物，属正常现象，不会影响转染效率。
6. 无论是贴壁细胞还是悬浮细胞，均把75μl Lipotap-DNA混合物全部加入六孔板的一个孔内。加入

   时注意尽量均匀加入到整个孔内，随后轻轻混匀。
7. 细胞培养箱内培养3-6小时后，去除含有Lipotap-DNA的培养液。每孔加入2ml新鲜细胞培养液继

   续培养。注：通常Lipotap-DNA混合物和细胞一起孵育3-10小时已经足够产生较高的转染效率。

   大多数细胞和Lipotap-DNA一起培养长达72小时未见明显细胞毒性。但转染后3-6小时更换新鲜培

   养液对于一些生长非常快速的细胞有助于提高转染效率。
8. 对于基因表达，再培养24-40小时后即可检测转染效果；对于RNAi通常需要培养3-5天，并且期间

   需要更换培养液。如果用于筛选稳定表达细胞株，则在转染后24-40小时即可加入适当的筛选药

   物，例如G418等，进行稳定表达细胞株的筛选。