pGL6(报告基因质粒)

 产品编号: D2102
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D2102 pGL6(报告基因质粒) 1μg 862.00元

    pGL6(报告基因质粒)是碧云天自行研发的用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
    pGL6主要用于在其多克隆位点插入特定的启动子、增强子等调控元件研究该调控序列的基因转录调控活性。
    pGL6质粒的主要信息如下:
    Base pairs                                                  5588
    Multiple cloning region                                     1-59
    luc2 reporter gene                                          89-1741
    SV40 late poly(A) signal                                    1776-1997
    SV40 early enhancer/promoter                                2045-2463
    Synthetic neomycin phosphotransferase(Neor)coding region    2488-3282
    Synthetic poly(A) signal                                    3307-3355
    Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region         3422-3441
    ColE1-derived plasmid replication origin                    3679
    Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region               4470-5330
    Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site         5435-5588
    Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region         5537-5556
    pGL6质粒的图谱如下:
             
    pGL6的多克隆位点的详细图谱如下:
         BglI         KpnI  NheI   XhoI   SacI  MluI   BglII
      1 GGCCTAACTG GCCGGTACCG CTAGCCTCGA GGAGCTCACG CGTAGATCTG
        CCGGATTGAC CGGCCATGGC GATCGGAGCT CCTCGAGTGC GCATCTAGAC
           HindIII
     51 CAGAAGCTTG GCAATCCGGT ACTGTTGGTA AAGCCACCAT GGAAGATGCC
        GTCTTCGAAC CGTTAGGCCA TGACAACCAT TTCGGTGGTA CCTTCTACGG
    pGL6中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pGL6)包括:
    Aat II    Afl II    Asc I     Ase I       Bsa I     BsaA I   BsiW I
    BspM II   BssH II   Eco72 I   EcoR I      EcoR V    Nde I    Nru I
    PflM I    Pme I     Pml I     Psp1406 I   PspA I    Rsr II
    Sma I     SnaB I    Spl I     Srf I       Tth111 I
    pGL6中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pGL6 once)包括:

Sfi I      GGCCN,NNN`NGGCC 9
Bgl I      GCCN,NNN`NGGC   9
Acc65 I    G`GTAC,C        15
Asp718     G`GTAC,C        15
Kpn I      G,GTAC`C        19
Nhe I      G`CTAG,C        21
PaeR7 I    C`TCGA,G        27
Xho I      C`TCGA,G        27
Sac I      G,AGCT`C        37
Mlu I      A`CGCG,T        39
Bgl II     A`GATC,T        45
Hind III   A`AGCT,T        55
BsrG I     T`GTAC,A        580
Dra III    CAC,NNN`GTG     1236
Gsu I      CTGGAG 21/19    1469
Bpm I      CTGGAG 22/20    1470
Apo I      R`AATT,Y        1852
Mun I      C`AATT,G        1916
BamH I     G`GATC,C        2009
Stu I       AGG|CCT         2442
EcoN I      CCTNN`N,NNAGG   2963
BsiC I      TT`CG,AA        3358
BstB I      TT`CG,AA        3358
Sal I       G`TCGA,C        3372
ApaL I      G`TGCA,C        3936
HgiE II     ACCNNNNNNGGT -1/134201
Not I       GC`GGCC,GC      4442
BstX I      CCAN,NNNN`NTGG  4466
BstE II     G`GTNAC,C       4469
Ahd I       GACNN,N`NNGTC   4544
Bsu36 I     CC`TNA,GG       4900
Pvu I       CG,AT`CG        4914
Sac II      CC,GC`GG        4938
Bst1107 I   GTA|TAC         5054
Xca I       GTA|TAC         5054
Spe I       A`CTAG,T        5373
BsmA I      GTCTC`/9        5385
BsmB I      CGTCTC 7/11     5386

    pGL6质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
    RVprimer3(5537-5556):
    CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC
    pGL6的全序列信息:d2102-pGL6-seq.txt
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D2102

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注意事项:
    本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人
或单位。
    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明

使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。
   抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. 用于插入调控序列:在多克隆位点选取适当的酶切位点,经酶切处理后连入适当的基因转录调控序列。
   pGL6也可以用作报告基因检测时的阴性对照。
3. pGL6质粒以及以此质粒为模板构建的质粒可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可以采用碧云天
   的萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG005/RG006)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG027/
   RG028)。

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