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pGL6-TA(报告基因质粒) |
产品编号: D2105
产品包装: 1μg
产品价格: 862.00元 |
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产品简介
产品简介:
pGL6-TA(报告基因质粒)是碧云天自行研发的用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶(firefly
luciferase)报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
pGL6-TA主要用于在其多克隆位点插入特定的启动子、增强子等调控元件研究该调控序列的基因转录调控活性。
pGL6-TA和pGL6相比在多克隆位点和luc基因之间加入了一段minimal TA promoter,使luc基因的基
础转录水平提高。
pGL6-TA质粒的主要信息如下:
Base pairs 5629
Multiple cloning region 1-59
Minimal TA promoter (pTA) 66-88
luc2 reporter gene 120-1782
SV40 late poly(A) signal 1817-2038
SV40 early enhancer/promoter 2086-2504
Synthetic neomycin phosphotransferase(Neor)coding region 2529-3323
Synthetic poly(A) signal 3348-3396
Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region 3463-3482
ColE1-derived plasmid replication origin 3720
Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region 4511-5371
Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site 5476-5629
Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region 5578-5597
pGL6-TA质粒的图谱如下:
pGL6-TA的多克隆位点的详细图谱如下:
BglI KpnI NheI XhoI SacI MluI BglII
1 GGCCTAACTG GCCGGTACCG CTAGCCTCGA GGAGCTCACG CGTAGATCTG
CCGGATTGAC CGGCCATGGC GATCGGAGCT CCTCGAGTGC GCATCTAGAC
HindIII Minimal TA promoter
51 CAGAAGCTTA GACACTAGAG GGTATATAAT GGAAGCTCGA CTTCCAGCTT
GTCTTCGAAT CTGTGATCTC CCATATATTA CCTTCGAGCT GAAGGTCGAA
pGL6-TA中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pGL6-TA)包括:
Aat II Afl II Asc I Ase I Bsa I BsaA I BsiW I
BspM II BssH II Eco72 I EcoR I EcoR V Nde I Nru I
PflM I Pme I Pml I Psp1406 I PspA I Rsr II Sma I
SnaB I Spl I Srf I Tth111 I
pGL6-TA中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pGL6-TA once)包括:
Sfi I GGCCN,NNN`NGGCC 9
Bgl I GCCN,NNN`NGGC 9
Acc65 I G`GTAC,C 15
Asp718 G`GTAC,C 15
Kpn I G,GTAC`C 19
Nhe I G`CTAG,C 21
PaeR7 I C`TCGA,G 27
Xho I C`TCGA,G 27
Sac I G,AGCT`C 37
Mlu I A`CGCG,T 39
Bgl II A`GATC,T 45
Hind III A`AGCT,T 55
BsrG I T`GTAC,A 621
Dra III CAC,NNN`GTG 1277
Gsu I CTGGAG 21/19 1510
Bpm I CTGGAG 22/20 1511
Apo I R`AATT,Y 1893
Mun I C`AATT,G 1957
BamH I G`GATC,C 2050 |
Stu I AGG|CCT 2483
EcoN I CCTNN`N,NNAGG 3004
BsiC I TT`CG,AA 3399
BstB I TT`CG,AA 3399
Sal I G`TCGA,C 3413
ApaL I G`TGCA,C 3977
HgiE II ACCNNNNNNGGT -1/134242
Not I GC`GGCC,GC 4483
BstX I CCAN,NNNN`NTGG 4507
BstE II G`GTNAC,C 4510
Ahd I GACNN,N`NNGTC 4585
Bsu36 I CC`TNA,GG 4941
Pvu I CG,AT`CG 4955
Sac II CC,GC`GG 4979
Bst1107 I GTA|TAC 5095
Xca I GTA|TAC 5095
Spe I A`CTAG,T 5414
BsmA I GTCTC`/9 5426
BsmB I CGTCTC 7/11 5427 |
pGL6-TA质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
RVprimer3(5578-5597):
CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC
pGL6-TA的全序列信息:D2105-pGL6-TA-seq.txt
包装清单:
产品编号 |
产品名称 |
包装 |
D2105 |
pGL6-TA(报告基因质粒) |
1μg |
— |
说明书 |
1份 |
保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人
或单位。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明
使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。
抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. 用于插入调控序列:在多克隆位点选取适当的酶切位点,经酶切处理后连入适当的基因转录调控序列。
pGL6也可以用作报告基因检测时的阴性对照。
3. pGL6质粒以及以此质粒为模板构建的质粒可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可以采用碧云天
的萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG005/RG006)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG027/
RG028)。
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