pAP1-TA-luc(报告基因质粒)

 产品编号: D2109
 产品包装: 1μg
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D2109 pAP1-TA-luc(报告基因质粒) 1μg 862.00元

    pAP1-TA-luc(报告基因质粒)是碧云天自行研发的用于检测AP1转录活性水平的报告基因质粒。pAP1-TA-luc是以碧云天的pGL6-TA质粒为模板,在其多克隆位点插入了多个AP1结合位点,可以高灵敏度地检测AP1的激活水平。
    pGL6-TA质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
    pAP1-TA-luc质粒的主要信息如下:
    Base pairs                                              5653
    AP1 response element                                    26-67
    Minimal TA promoter (pTA)                               90-112
    luc2 reporter gene                                      154-1806
    SV40 late poly(A) signal                                1841-2062
    SV40 early enhancer/promoter                            2110-2528
    Synthetic neomycin phosphotransferase
     (Neor) coding region                                   2553-3347
    Synthetic poly(A) signal                                3372-3420
    Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region     3487-3506
    ColE1-derived plasmid replication origin                3744
    Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region           4535-5395
    Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site     5500-5653
    Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region     5602-5621
    pAP1-TA-luc质粒的图谱如下:
            
    pAP1-TA-luc的多克隆位点及AP1 response element的详细图谱如下:
       BglI         KpnI  NheI        AP1 response elememt
    1 GGCCTAACTG GCCGGTACCG CTAGCTGACT AATGACTAAT GACTAATGAC
      CCGGATTGAC CGGCCATGGC GATCGACTGA TTACTGATTA CTGATTACTG
                        BglII      HindIII      Minimal TA promoter
   51 TAATGACTAA TGACTAAAGA TCTGCAGAAG CTTAGACACT AGAGGGTATA
      ATTACTGATT ACTGATTTCT AGACGTCTTC GAATCTGTGA TCTCCCATAT
    pAP1-TA-luc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pAP1-TA-luc)包括:
    Aat II     Afl II     Asc I      Ase I      Bsa I     BsaA I     BsiW I     BspM II
    BssH II    Eco72 I    EcoR I     EcoR V     Mlu I     Nde I      Nru I      PaeR7 I
    PflM I     Pme I      Pml I      Psp1406 I  PspA I    Rsr II     Sac I      Sma I
    SnaB I     Spl I      Srf I      Tth111 I   Vsp I     Xcm I      Xho I      Xma I
    pAP1-TA-luc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pAP1-TA-luc once)包括:

Sfi I       GGCCN,NNN`NGGCC 9
Bgl I       GCCN,NNN`NGGC   9
Acc65 I     G`GTAC,C        15
Asp718      G`GTAC,C        15
Kpn I       G,GTAC`C        19
Nhe I       G`CTAG,C        21
Bgl II      A`GATC,T        69
Hind III    A`AGCT,T        79
BsrG I      T`GTAC,A        645
Dra III     CAC,NNN`GTG     1301
Gsu I       CTGGAG 21/19    1534
Bpm I       CTGGAG 22/20    1535
Apo I       R`AATT,Y        1917
Mun I       C`AATT,G        1981
BamH I      G`GATC,C        2074
Stu I       AGG|CCT         2507
EcoN I      CCTNN`N,NNAGG   3028
BsiC I      TT`CG,AA        3423

BstB I      TT`CG,AA        3423
Sal I       G`TCGA,C        3437
Afl III     A`CRYG,T        3687
ApaL I      G`TGCA,C        4001
HgiE II     ACCNNNNNNGGT -1/134266
Not I       GC`GGCC,GC      4507
BstX I      CCAN,NNNN`NTGG  4531
BstE II     G`GTNAC,C       4534
Ahd I       GACNN,N`NNGTC   4609
Bsu36 I     CC`TNA,GG       4965
Pvu I       CG,AT`CG        4979
Sac II      CC,GC`GG        5003
Bst1107 I   GTA|TAC         5119
Xca I       GTA|TAC         5119
Spe I       A`CTAG,T        5438
BsmA I      GTCTC`/9        5450
BsmB I      CGTCTC 7/11     5451

    pAP1-TA-luc质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
    RVprimer3 (5602-5621):
    CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC
    pAP1-TA-luc的全序列信息:d2109-pAP1-TA-luc-seq.txt
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D2109

pAP1-TA-luc(报告基因质粒)

1μg

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保存条件:
   -20℃保存。
注意事项:
    本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人
或单位。
    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明

使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。
   抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. pAP1-luc可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可以采用碧云天的萤火虫萤光素酶报告基因检测
   试剂盒(RG005/RG006)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG027/RG028)。
3. TNF-α、PMA等常见的可以激活AP1的试剂,可以用作pAP1-TA-luc报告基因检测时的阳性对照。

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   Li YX.
   Testes-specific protease 50 (TSP50) promotes cell proliferation through the activation of
   thenuclear factor κB (NF-κB) signalling pathway.

   Biochem J. 2011 Jun 1;436(2):457-67.




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