|
pNFκB-luc(报告基因质粒) |
产品编号: D2206
产品包装: 1μg
产品价格: 862.00元 |
|
|
|
产品简介
产品简介:
pNFκB-luc(报告基因质粒)是碧云天自行研发的用于检测NFκB转录活性水平的报告基因质粒。
pNFκB-luc是以碧云天的pGL6质粒为模板,在其多克隆位点插入了多个NFκB结合位点,可以高灵敏度地检测NFκB的激活水平。
pGL6质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)报告基因检测的新一
代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
pNFκB-luc质粒的主要信息如下:
Base pairs 5610
NFκB response element (κB) 26-65
luc2 reporter gene 111-1763
SV40 late poly(A) signal 1798-2019
SV40 early enhancer/promoter 2067-2485
Synthetic neomycin phosphotransferase
(Neor) coding region 2510-3304
Synthetic poly(A) signal 3329-3377
Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region 3444-3463
ColE1-derived plasmid replication origin 3701
Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region 4492-5352
Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site 5457-5610
Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region 5559-5578
pNFκB-luc质粒的图谱如下:
pNFκB-luc的多克隆位点及NFκB response element的详细图谱如下:
BglI KpnI NheI NFkB response elememt
1 GGCCTAACTG GCCGGTACCG CTAGCGGGAA TTTCCGGGAA TTTCCGGGAA
CCGGATTGAC CGGCCATGGC GATCGCCCTT AAAGGCCCTT AAAGGCCCTT
BglII HindIII
51 TTTCCGGGAA TTTCCAGATC TGCAGAAGCT TGGCAATCCG GTACTGTTGG
AAAGGCCCTT AAAGGTCTAG ACGTCTTCGA ACCGTTAGGC CATGACAACC
pNFκB-luc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pNFκB-luc))包括:
Aat II Afl II Asc I Ase I Bsa I BsaA I BsiW I BspM II
BssH II Eco72 I EcoR I EcoR V Mlu I Nde I Nru I PaeR7 I
PflM I Pme I Pml I Psp1406 I PspA I Rsr II Sac I Sma I
SnaB I Spl I Srf I Tth111 I Vsp I Xcm I Xho I Xma I
pNFκB-luc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pNFκB-luc once)包括:
Sfi I GGCCN,NNN`NGGCC 9
Bgl I GCCN,NNN`NGGC 9
Acc65 I G`GTAC,C 15
Asp718 G`GTAC,C 15
Kpn I G,GTAC`C 19
Nhe I G`CTAG,C 21
Bgl II A`GATC,T 67
Hind III A`AGCT,T 77
BsrG I T`GTAC,A 602
Dra III CAC,NNN`GTG 1258
Gsu I CTGGAG 21/19 1491
Bpm I CTGGAG 22/20 1492
Mun I C`AATT,G 1938
BamH I G`GATC,C 2031
Stu I AGG|CCT 2464
EcoN I CCTNN`N,NNAGG 2985
BsiC I TT`CG,AA 3380 |
BstB I TT`CG,AA 3380
Sal I G`TCGA,C 3394
Afl III A`CRYG,T 3644
ApaL I G`TGCA,C 3958
HgiE II ACCNNNNNNGGT -1/134223
Not I GC`GGCC,GC 4464
BstX I CCAN,NNNN`NTGG 4488
BstE II G`GTNAC,C 4491
Ahd I GACNN,N`NNGTC 4566
Bsu36 I CC`TNA,GG 4922
Pvu I CG,AT`CG 4936
Sac II CC,GC`GG 4960
Bst1107 I GTA|TAC 5076
Xca I GTA|TAC 5076
Spe I A`CTAG,T 5395
BsmA I GTCTC`/9 5407
BsmB I CGTCTC 7/11 5408 |
pNFκB-luc质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
RVprimer3(5559-5578):
CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC
pNFκB-luc的全序列信息:D2206-pNFkappaB-luc-seq.txt
包装清单:
产品编号 |
产品名称 |
包装 |
D2206 |
pNFκB-luc(报告基因质粒) |
1μg |
— |
说明书 |
1份 |
保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人
或单位。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明
使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。
抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. pNFκB-luc可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可以采用碧云天的萤火虫萤光素酶报告基因检测
试剂盒(RG005/RG006)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG027/RG028)。
3. TNF-α、IL-1β和LPS等是常见的可以激活NFκB的试剂,可以用作pNFκB-luc报告基因检测时的阳
性对照。
产品图片
相关产品
相关论文
使用本产品的文献:
1. Tian YP, Jiang W, Gao N, Zhang JL, Chen W, Fan DY, Zhou DS, An J.
Inhibitory effects of glutathione on dengue virus production.
Biochemical and Biophysical Research Communications 397 (2010) 420–424.
2. Du RH, Li EG, Cao Y, Song YC, Tan RX.
Fumigaclavine C inhibits tumor necrosis factor α production via suppression of toll-
like receptor 4 and nuclear factor κB activation in macrophages.
Life Sci. 2011 Aug 15;89(7-8):235-40.
3. Chen FH, Lu N, Zhang HW, Zhao L, He LC, Sun HP, You QD, Li ZY, Guo QL.
LYG-202 augments tumor necrosis factor-α-induced apoptosis via attenuating casein
kinase 2-dependent nuclearfactor-κB pathway in HepG2 cells.
Mol Pharmacol. 2012 Nov;82(5):958-71. doi: 10.1124/mol.112.079848. Epub 2012 Aug 21.
4. Chen X, Ren F, Hesketh J, Shi X, Li J, Gan F, Huang K.
Reactive oxygen species regulate the replication of porcine circovirus type 2 via
NF-κB pathway.
Virology. 2012 Apr 25;426(1):66-72. doi: 10.1016/j.virol.2012.01.023.
Epub 2012 Feb 11.
5. Xue P, Zheng M, Diao Z, Shen L, Liu M, Gong P, Sun H, Hu Y.
miR-155* mediates suppressive effect of PTEN 3'-untranslated region on AP-1/NF-κB
pathway in
HTR-8/SVneo cells.
Placenta. 2013 Aug;34(8):650-6. doi: 10.1016/j.placenta.2013.04.015. Epub 2013 May 16.
6. Hu P, Huang P, Chen MW.
Curcumin attenuates cyclooxygenase-2 expression via inhibition of the NF‐κB pathway in
lipopolysaccharide‐stimulated human gingival fibroblasts.
Cell Biol Int. 2013 May;37(5):443-8. doi: 10.1002/cbin.10050. Epub 2013 Mar 14.
7. Song Y, Dou H, Gong W, Liu X, Yu Z, Li E, Tan R, Hou Y.
Bis-N-norgliovictin, a small-molecule compound from marine fungus, inhibits LPS-induced
inflammation inmacrophages and improves survival in sepsis.
Eur J Pharmacol.2013 Apr 5;705(1-3):49-60.doi 10.1016/j.ejphar.2013.02.008.
Epub 2013 Feb 22.
8. Xi P, Ding D, Zhou J, Wang M, Cong YS.
DDRGK1 regulates NF-κB activity by modulating IκBα stability.
PLoS One. 2013 May 10;8(5):e64231. doi: 10.1371/journal.pone.0064231. Print 2013.
9. Chen J, Xu L, Huang C.
DHEA inhibits vascular remodeling following arterial injury: a possible role in
suppression of inflammation and oxidative stress derived from vascular smooth muscle
cells.
Mol Cell Biochem. 2014 Mar;388(1-2):75-84. doi: 10.1007/s11010-013-1900-7.
Epub 2013 Nov 28.
|