pAAT-promoter-luc(报告基因质粒)

 产品编号: D2306
 产品包装: 1μg
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产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D2306 pAAT-promoter-luc(报告基因质粒) 1μg 862.00元

    pAAT-promoter-luc(报告基因质粒)是碧云天自行研发的用于检测AAT promoter转录活性水平的报告基因质粒。
    pAAT-promoter-luc是以碧云天的pGL6质粒为模板,在其多克隆位点插入了human AAT的启动子序
列,可以高灵敏度地检测AAT promoter的激活水平。
    AAT(alpha 1-Antitrypsin或alpha-1 antiproteinase,也简称为A1AT),又称serine peptidase
inhibitor,clade A,member 1或serine proteinase inhibitor,clade A,member 1(简称SERPINA1),是一种可以被分泌到细胞外的丝氨酸蛋白酶抑制剂,可以抑制elastase、plasmin、thrombin、trypsin和chymotrypsin等。AAT基因缺陷时会导致肺气肿(emphysema)或肝脏疾病等。
    pGL6质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)报告基因检测的新一
代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
    pAAT-promoter-luc质粒的主要信息如下:
    Base pairs                                                   6445
    AAT promoter                                                 20-900
    luc2 reporter gene                                           946-2598
    SV40 late poly(A) signal                                     2633-2854
    SV40 early enhancer/promoter                                 2902-3320
    Synthetic neomycin phosphotransferase
    (Neor) coding region                                         3345-4139
    Synthetic poly(A) signal                                     4164-4212
    Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region          4279-4298
    ColE1-derived plasmid replication origin                     4536
    Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region                5327-6187
    Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site          6292-6445
    Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region          6394-6413
    pAAT-promoter-luc质粒的图谱如下:
             
    pAAT-promoter-luc的多克隆位点及AAT-promoter的详细图谱如下:
         BglI         KpnI       AAT promoter            BamHI
    1   GGCCTAACTG GCCGGTACCT TCCCTGGTCT GAATGTGTGT GCTGGAGGAT
        CCGGATTGAC CGGCCATGGA AGGGACCAGA CTTACACACA CGACCTCCTA
    51  CCTGTGGGTC ACTCGCCTGG TAGAGCCCCA AGGTGGAGGC ATAAATGGGA
        GGACACCCAG TGAGCGGACC ATCTCGGGGT TCCACCTCCG TATTTACCCT
    101 CTGGTGAATG ACAGAAGGGG CAAAAATGCA CTCATCCATT CACTCTGCAA
        GACCACTTAC TGTCTTCCCC GTTTTTACGT GAGTAGGTAA GTGAGACGTT
    151 GTATCTACGG CACGTACGCC AGCTCCCAAG CAGGTTTGCG GGTTGCACAG
        CATAGATGCC GTGCATGCGG TCGAGGGTTC GTCCAAACGC CCAACGTGTC
                                                            ApaI
    201 CGGGCGATGC AATCTGATTT AGGCTTTTAA AGGGATTGCA ATCAAGTGGG
        GCCCGCTACG TTAGACTAAA TCCGAAAATT TCCCTAACGT TAGTTCACCC
    251 GCCCCACTAG CCTCAACCCT GTACCTCCCC TCCCCTCCAC CCCCAGCAGT
        CGGGGTGATC GGAGTTGGGA CATGGAGGGG AGGGGAGGTG GGGGTCGTCA
              StuI
    301 CTCCAAAGGC CTCCAACAAC CCCAGAGTGG GGGCCATGTA TCCAAAGAAA
        GAGGTTTCCG GAGGTTGTTG GGGTCTCACC CCCGGTACAT AGGTTTCTTT
    351 CTCCAAGCTG TATATGGATC ACACTGGTTT TCCAGGAGCA AAAACAGAAA
        GAGGTTCGAC ATATACCTAG TGTGACCAAA AGGTCCTCGT TTTTGTCTTT
    401 CAGGCCTGAG GCTGGTCAAA ATTGAACCTC CTCCTGCTCT GAGCAGCCTG
        GTCCGGACTC CGACCAGTTT TAACTTGGAG GAGGACGAGA CTCGTCGGAC
    451 GGGGGCAGAC TAAGCAGAGG GCTGTGCAGA CCCACATAAA GAGCCTACTG
        CCCCCGTCTG ATTCGTCTCC CGACACGTCT GGGTGTATTT CTCGGATGAC
    501 TGTGCCAGGC ACTTCACCCG AGGCACTTCA CAAGCATGCT TGGGAATGAA
        ACACGGTCCG TGAAGTGGGC TCCGTGAAGT GTTCGTACGA ACCCTTACTT
    551 ACTTCCAACT CTTTGGGATG CAGGTGAAAC AGTTCCTGGT TCAGAGAGGT
        TGAAGGTTGA GAAACCCTAC GTCCACTTTG TCAAGGACCA AGTCTCTCCA
    601 GAAGCGGCCT GCCTGAGGCA GCACAGCTCT TCTTTACAGA TGTGCTTCCC
        CTTCGCCGGA CGGACTCCGT CGTGTCGAGA AGAAATGTCT ACACGAAGGG
    651 CACCTCTACC CTGTCTCACG GCCCCCCATG CCAGCCTGAC GGTTGTGTCT
        GTGGAGATGG GACAGAGTGC CGGGGGGTAC GGTCGGACTG CCAACACAGA
    701 GCCTCAGTCA TGCTCCATTT TTCCATCGGG ACCATCAAGA GGGTGTTTGT
        CGGAGTCAGT ACGAGGTAAA AAGGTAGCCC TGGTAGTTCT CCCACAAACA
    751 GTCTAAGGCT GACTGGGTAA CTTTGGATGA GCGGTCTCTC CGCTCTGAGC
        CAGATTCCGA CTGACCCATT GAAACCTACT CGCCAGAGAG GCGAGACTCG
    801 CTGTTTCCTC ATCTGTCAAA TGGGCTCTAA CCCACTCTGA TCTCCCAGGG
        GACAAAGGAG TAGACAGTTT ACCCGAGATT GGGTGAGACT AGAGGGTCCC
    851 CGGCAGTAAG TCTTCAGCAT CAGGCATTTT GGGGTGACTC AGTAAATGGT
        GCCGTCATTC AGAAGTCGTA GTCCGTAAAA CCCCACTGAG TCATTTACCA
        BglII      HindIII
    901 AGATCTGCAG AAGCTTGGCA ATCCGGTACT GTTGGTAAAG CCACCATGGA
        TCTAGACGTC TTCGAACCGT TAGGCCATGA CAACCATTTC GGTGGTACCT

    pAAT-promoter-luc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pAAT-promoter-luc)包括:
     Aat II    Afl II    Asc I       Ase I     BspM II
     BssH II   Eco72 I   EcoR I      EcoR V    Mlu I
     Nde I     Nhe I     Nru I       PaeR7 I   PflM I
     Pme I     Pml I     Psp1406 I   PspA I    Rsr II
     Sac I     Sma I     SnaB I      Srf I     Tth111 I
    pAAT-promoter-luc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pAAT-promoter-luc once)包括:

Sfi I      GGCCN,NNN`NGGCC    9
Acc65 I    G`GTAC,C           15
Asp718     G`GTAC,C           15
Kpn I      G,GTAC`C           19
BsaA I     YAC|GTR            164
BsiW I     C`GTAC,G           164
Spl I      C`GTAC,G           164
Xcm I      CCANNNN,N`NNNNTGG  361
Xmn I      GAANN|NNTTC        581
Bsa I      GGTCTC 7/11        790
Bgl II     A`GATC,T           902
Hind III   A`AGCT,T           912
BsrG I     T`GTAC,A           1437
Dra III    CAC,NNN`GTG        2093
Apo I      R`AATT,Y           2709

Mun I       C`AATT,G       2773
BsiC I      TT`CG,AA       4215
BstB I      TT`CG,AA       4215
Sal I       G`TCGA,C       4229
Afl III     A`CRYG,T       4479
ApaL I      G`TGCA,C       4793
Not I       GC`GGCC,GC     5299
BstE II     G`GTNAC,C      5326
Ahd I       GACNN,N`NNGTC  5401
Pvu I       CG,AT`CG       5771
Sac II      CC,GC`GG       5795
Bst1107 I   GTA|TAC        5911
Xca I       GTA|TAC        5911
Spe I       A`CTAG,T       6230
BsmB I      CGTCTC 7/11    6243

    pAAT-promoter-luc质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
    RVprimer3 (6394-6413):
    CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC
    pAAT-promoter-luc的全序列信息: D2306 pAAT-promoter-luc-seq.txt
包装清单:

产品编号

产品名称

包装

D2306

pAAT-promoter-luc(报告基因质粒)

1μg

说明书

1份

保存条件:
   -20℃保存。
注意事项:
    本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人
或单位。
    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明

使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。
   抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. pAAT-promoter-luc可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可以采用碧云天的萤火虫萤光素酶报告
   基因检测试剂盒(RG005/RG006)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG027/RG028)。
3. 可以激活AAT promoter的试剂,可以用作pAAT-promoter-luc报告基因检测时的阳性对照。

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