pTNF-α-promoter-luc(报告基因质粒)

 产品编号: D2480
 产品包装: 1μg
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D2480 pTNF-α-promoter-luc(报告基因质粒) 1μg 862.00元

    pTNF-α-promoter-luc(报告基因质粒)是碧云天自行研发的用于检测TNF-α promoter转录活性水平的报告基因质粒。
    pTNF-α-promoter-luc是以碧云天的pGL6质粒为模板,在其多克隆位点插入了human TNF-α的启动
子序列(-991bp~+1bp),可以高灵敏度地检测human TNF-α promoter的激活水平。
    TNF-α(Tumor Necrosis Factor α),中文名为肿瘤坏死因子α,是一种非常重要的炎性细胞因
子,在炎性疾病的发生发展过程中起重要作用,常作为炎症反应的重要指标。
    pGL6质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)报告基因检测的新一
代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
    pTNF-α-promoter-luc质粒的主要信息如下:
    Base pairs                                                              6555
    hTNF-α promoter                                                         20-1010
    luc2 reporter gene                                                      1056-2708
    SV40 late poly(A)signal                                                 2743-2964
    SV40 early enhancer/promoter                                            3012-3430
    Synthetic neomycin phosphotransferase(Neor)coding region                3455-4249
    Synthetic poly(A)signal                                                 4274-4322
    Reporter Vector primer 4(RVprimer4)binding region                       4389-4408
    ColE1-derived plasmid replication origin                                4646
    Synthetic Beta-lactamase(Ampr)coding region                             5437-6297
    Synthetic poly(A)signal/transcriptional pause site                      6402-6555
    Reporter Vector primer 3(RVprimer3)binding region                       6504-6523
    pTNF-α-promoter-luc质粒的图谱如下:
           
    pTNF-α-promoter-luc的多克隆位点及TNF-α promoter的详细图谱如下:
          BglI         KpnI                   TNF-α promoter
    1    GGCCTAACTG GCCGGTACCA GCTCCTGGGA GATATGGCCA CATGTAGCGG
         CCGGATTGAC CGGCCATGGT CGAGGACCCT CTATACCGGT GTACATCGCC
    51   CTCTGAGGAA TGGGTTACAG GAGACCTCTG GGGAGATGTG ACCACAGCAA
         GAGACTCCTT ACCCAATGTC CTCTGGAGAC CCCTCTACAC TGGTGTCGTT
    101  TGGGTAGGAG AATGTCCAGG GCTATGGAAG TCGAGTATGG GGACCCCCCC
         ACCCATCCTC TTACAGGTCC CGATACCTTC AGCTCATACC CCTGGGGGGG
    151  TTAACGAAGA CAGGGCCATG TAGAGGGCCC CAGGGAGTGA AAGAGCCTCC
         AATTGCTTCT GTCCCGGTAC ATCTCCCGGG GTCCCTCACT TTCTCGGAGG
    201  AGGACCTCCA GGTATGGAAT ACAGGGGACG TTTAAGAAGA TATGGCCACA
         TCCTGGAGGT CCATACCTTA TGTCCCCTGC AAATTCTTCT ATACCGGTGT
    251  CACTGGGGCC CTGAGAAGTG AGAGCTTCAT GAAAAAAATC AGGGACCCCA
         GTGACCCCGG GACTCTTCAC TCTCGAAGTA CTTTTTTTAG TCCCTGGGGT
    301  GAGTTCCTTG GAAGCCAAGA CTGAAACCAG CATTATGAGT CTCCGGGTCA
         CTCAAGGAAC CTTCGGTTCT GACTTTGGTC GTAATACTCA GAGGCCCAGT
                                                EcoRI XmaI/SmaI
    351  GAATGAAAGA AGAAGGCCTG CCCCAGTGGG GTCTGTGAAT TCCCGGGGGT
         CTTACTTTCT TCTTCCGGAC GGGGTCACCC CAGACACTTA AGGGCCCCCA
                    XmaI/SmaI
    401  GATTTCACTC CCCGGGGCTG TCCCAGGCTT GTCCCTGCTA CCCCCACCCA
         CTAAAGTGAG GGGCCCCGAC AGGGTCCGAA CAGGGACGAT GGGGGTGGGT
    451  GCCTTTCCTG AGGCCTCAAG CCTGCCACCA AGCCCCCAGC TCCTTCTCCC
         CGGAAAGGAC TCCGGAGTTC GGACGGTGGT TCGGGGGTCG AGGAAGAGGG
    501  CGCAGGGACC CAAACACAGG CCTCAGGACT CAACACAGCT TTTCCCTCCA
         GCGTCCCTGG GTTTGTGTCC GGAGTCCTGA GTTGTGTCGA AAAGGGAGGT
    551  ACCCCGTTTT CTCTCCCTCA AGGACTCAGC TTTCTGAAGC CCCTCCCAGT
         TGGGGCAAAA GAGAGGGAGT TCCTGAGTCG AAAGACTTCG GGGAGGGTCA
    601  TCTAGTTCTA TCTTTTTCCT GCATCCTGTC TGGAAGTTAG AAGGAAACAG
         AGATCAAGAT AGAAAAAGGA CGTAGGACAG ACCTTCAATC TTCCTTTGTC
    651  GCCACAGACC TGGTCCCCAA AAGAAATGGA GGCAATAGGT TTTGAGGGGC
         CGGTGTCTGG ACCAGGGGTT TTCTTTACCT CCGTTATCCA AAACTCCCCG
    701  ATGGGGACGG GGTTCAGCCT CCAGGGTCCT ACACACAAAT CAGTCAGTGG
         TACCCCTGCC CCAAGTCGGA GGTCCCAGGA TGTGTGTTTA GTCAGTCACC
    751  CCCAGAAGAC CCCCCTCGGA ATCGGAGCAG GGAGGATGGG GAGTGTGAGG
         GGGTCTTCTG GGGGGAGCCT TAGCCTCGTC CCTCCTACCC CTCACACTCC
    801  GGTATCCTTG ATGCTTGTGT GTCCCCAACT TTCCAAATCC CCGCCCCCGC
         CCATAGGAAC TACGAACACA CAGGGGTTGA AAGGTTTAGG GGCGGGGGCG
    851  GATGGAGAAG AAACCGAGAC AGAAGGTGCA GGGCCCACTA CCGCTTCCTC
         CTACCTCTTC TTTGGCTCTG TCTTCCACGT CCCGGGTGAT GGCGAAGGAG
              SacI
    901  CAGATGAGCT CATGGGTTTC TCCACCAAGG AAGTTTTCCG CTGGTTGAAT
         GTCTACTCGA GTACCCAAAG AGGTGGTTCC TTCAAAAGGC GACCAACTTA
    951  GATTCTTTCC CCGCCCTCCT CTCGCCCCAG GGACATATAA AGGCAGTTGT
         CTAAGAAAGG GGCGGGAGGA GAGCGGGGTC CCTGTATATT TCCGTCAACA
                        PstI
                 -1 BglII      HindIII
    1001 TGGCACACCC AGATCTGCAG AAGCTTGGCA ATCCGGTACT GTTGGTAAAG
         ACCGTGTGGG TCTAGACGTC TTCGAACCGT TAGGCCATGA CAACCATTTC
    pTNF-α-promoter-luc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pTNF-α-promoter-luc)包括:
    Aat II    Afl II    Asc I    Ase I       BsaA I   BsiW I   BspM II
    BssH II   Eco72 I   EcoR V   Mlu I       Nde I    Nhe I    Nru I
    PaeR7 I   Pme I     Pml I    Psp1406 I   Rsr II   SnaB I   Spl I
    Srf I     Vsp I     Xcm I    Xho I
    pTNF-α-promoter-luc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut ppTNF-α-promoter-luc once)包括:

Sfi I      GGCCN,NNN`NGGCC  9
Bgl I      GCCN,NNN`NGGC    9
Acc65 I    G`GTAC,C         15
Asp718     G`GTAC,C         15
Kpn I      G,GTAC`C         19
Bsa I      GGTCTC 7/11      66
EcoR I     G`AATT,C         388
Tth111 I   GACN`N,NGTC      661
Sac I      G,AGCT`C         911
Bgl II     A`GATC,T         1012
Hind III   A`AGCT,T         1022
BsrG I     T`GTAC,A         1547
Dra III    CAC,NNN`GTG      2203
Mun I      C`AATT,G         2883
BamH I     G`GATC,C         2976

EcoN I      CCTNN`N,NNAGG   3930
BsiC I      TT`CG,AA        4325
BstB I      TT`CG,AA        4325
Sal I       G`TCGA,C        4339
ApaL I      G`TGCA,C        4903
HgiE II     ACCNNNNNNGGT -1/13 5168
Not I       GC`GGCC,GC      5409
BstE II     G`GTNAC,C       5436
Ahd I       GACNN,N`NNGTC   5511
Pvu I       CG,AT`CG        5881
Sac II      CC,GC`GG        5905
Bst1107 I   GTA|TAC         6021
Xca I       GTA|TAC         6021
Spe I       A`CTAG,T        6340
BsmB I      CGTCTC 7/11     6353

    pTNF-α-promoter-luc质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
    RVprimer3(6504-6523):
    CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC
    pTNF-α-promoter-luc的全序列信息: D2480-pTNF-α-promoter-luc-seq.txt
包装清单:

产品编号

产品名称

包装

D2480

pTNF-α-promoter-luc(报告基因质粒)

1μg

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1份

保存条件:
   -20℃保存。
注意事项:
    本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人
或单位。
    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明

使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。
   抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. pTNF-α-promoter-luc可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可以采用碧云天的萤火虫萤光素酶
   报告基因检测试剂盒(RG005/RG006)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG027/RG028)。
3. LPS等是常见的可以激活TNF-α的转录的试剂,可以用作pTNF-α-promoter-luc报告基因检测时的阳性
   对照。

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1. He J, Wang S, Zeng Y, You X, Ma X, Wu N, Wu Y.
   Binding of CD14 to Mycoplasma genitalium-derived lipid-associated membrane proteins
   upregulates TNF-α.

   Inflammation. 2014 Apr;37(2):322-30. doi: 10.1007/s10753-013-9743-7.




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