pRL-SV40-N(报告基因质粒)

 产品编号: D2762
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D2762 pRL-SV40-N(报告基因质粒) 1μg 862.00元

    pRL-SV40-N(报告基因质粒)是碧云天自行研发的用于在哺乳动物细胞中进行海肾萤光素酶(Renilla luciferase)报告基因检测的质粒,主要用于在其多克隆位点插入感兴趣的5’-UTR、启动子、增强子等调控元件研究该调控序列的基因转录调控活性,或用作萤火虫荧光素酶(firefly luciferase)报告基因检测时的内参。也可以使用Bgl II位点切除SV40 early enhancer/promoter,以降低本底性的转录,并插入感兴趣的5’-UTR等调控元件研究该调控序列的基因转录调控活性。研究3’-UTR并希望使用海肾荧光素酶时,推荐使用D2768 pRL-SV40-C
    pRL-SV40-N质粒含有SV40早期增强子和启动子,可以实现海肾荧光素酶在哺乳动物细胞内的高效表达。
    pRL-SV40-N质粒携带renilla luciferase基因,编码分子量为36kD的海肾荧光素酶,翻译后无需修饰,常用于报告基因检测。
    本质粒为氨苄抗性。
    pRL-SV40-N质粒的主要信息如下:
    Feature Nucleotide                                             Position
    SV40 early enhancer/promoter                                   7-418
    Multiple cloning site                                          421-480
    Chimeric intron                                                546-682
    T7 RNA polymerase transcription(-17 to +2)                     726-744
    T7 RNA polymerase transcription initiation site                743
    Rluc reporter gene                                             754-1689
    SV40 late polyadenylation signal                               1731-1932
    β-lactamase (Ampr) coding region                              2079-2939
    pRL-SV40-N质粒(3765bp)的图谱如下:
       
    pRL-SV40-N的多克隆位点的详细图谱如下:
                                                  EcoRI
                        XhoI  SacI  MluI   HindIII       EcoRV
    411 TTTTGCAAAA AGCTCCTCGA GGAGCTCACG CGTAAGCTTG AATTCGATAT
        AAAACGTTTT TCGAGGAGCT CCTCGAGTGC GCATTCGAAC TTAAGCTATA
         SalI  SpeI   ApaI
    461 CGTCGACACT AGTGGGCCCC AGCTTGATTC TTCTGACACA ACAGTCTCGA
        GCAGCTGTGA TCACCCGGGG TCGAACTAAG AAGACTGTGT TGTCAGAGCT
    pRL-SV40-N中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pRL-SV40-N)包括:
    AatII      AgeI         AscI       BbeI         BlpI      BsgI      BsiWI
    BsmBI      BspMII       BssHII     Bst1107I     BstEII    BstXI     Bsu36I
    DraIII     Eco47III     Eco72I     EheI         EspI      FseI      KasI
    MscI       NaeI         NarI       NdeI         NgoMI     NruI      PflMI
    PmeI       PmlI         PpuMI      PspAI        RsrII     SacII     SapI
    SmaI       SnaBI        SplI       SrfI         Tth111I
    pRL-SV40-N中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pRL-SV40-N once)包括:

      BglII     A`GATC,T                  1
      Acc65I    G`GTAC,C                  54
      Asp718    G`GTAC,C                  54
      KpnI      G,GTAC`C                  58
      PvuII     CAG|CTG                   80
      SfiI      GGCCN,NNN`NGGCC           357
      StuI      AGG|CCT                   403
      AvrII     C`CTAG,G                  404
      AvaI      C`YCGR,G                  426
      PaeR7I    C`TCGA,G                  426
      XhoI      C`TCGA,G                  426
      SacI      G,AGCT`C                  436
      MluI      A`CGCG,T                  438
      HinDIII   A`AGCT,T                  444
      EcoRI     G`AATT,C                  450
      EcoRV     GAT|ATC                   458
      SalI      G`TCGA,C                  462
      AccI      GT`MK,AC                  463
      SpeI      A`CTAG,T                  468
      Bsp120I   G`GGCC,C                  474
      EcoO109I  RG`GNC,CY                 475
      ApaI      G,GGCC`C                  478
      PstI      C,TGCA`G                  522
      BspMI     ACCTGC 10/14              536
      NheI      G`CTAG,C                  744
      BsiCI     TT`CG,AA                  760
      BstBI     TT`CG,AA                  760

XcmI      CCANNNN,N`NNNNTGG              1403
BsrGI     T`GTAC,A                       1452
BsaAI     YAC|GTR                        1486
XbaI      T`CTAG,A                       1691
NotI      GC`GGCC,GC                     1698
EagI      C`GGCC,G                       1698
XmaIII    C`GGCC,G                       1698
HpaI      GTT|AAC                        1841
MunI      C`AATT,G                       1850
ClaI      AT`CG,AT                       1936
BsaBI     GATNN|NNATC                    1942
BamHI     G`GATC,C                       1943
SspI      AAT|ATT                        2061
Bsp1286I  G,DGCH`C                       2283
AhaII     GR`CG,YC                       2326
BsaHI     GR`CG,YC                       2326
HinII     GR`CG,YC                       2326
PvuI      CG,AT`CG                       2497
EcoNI     CCTNN`N,NNAGG                  2505
Cfr10I    R`CCGG,Y                       2781
GsuI      CTGGAG 21/19`                  2796
BpmI      CTGGAG 22/20                   2797
AhdI      GACNN,N`NNGTC                  2866
PleI      GAGTC 9/10                     2875
HgiEII    ACCNNNNNNGGT1/13               3165
AlwNI     CAG,NNN`CTG                    3345
HaeII     R,GCGC`Y                       3514

    pRL-SV40-N质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
    T7 Primer(726-744): TAATACGACTCACTATAGG
    pRL-SV40-N的全序列信息: D2762 pRL-SV40-N-seq.txt
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D2762

pRL-SV40-N(报告基因质粒)

1μg

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保存条件:
   -20℃保存。
注意事项:
    本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
    本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明

使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽
   提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. pRL-SV40-N质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入感兴趣的5’-UTR、启动子、增强子等调控元
   件,构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
3. pRL-SV40-N质粒或使用该质粒构建的新质粒转染细胞后,后续可以采用碧云天的海肾萤光素酶报告基
   因检测试剂盒(RG016/RG017)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG027/RG028)检测海肾荧光素酶的表
   达水平。
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