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产品原理

Amplex Red系列检测原理：

在辣根过氧化物酶(HRP)、髓过氧化物酶(MPO)等过氧化物酶存在的情况下，Amplex Red能与H₂O₂ 1:1反应，产生强烈的红色荧光物质试卤灵(resorufin)。
由于在许多酶催化的氧化还原反应中都会产生H₂O₂，通过检测试卤灵的荧光强度或吸光度即可确定样品中的氧化酶、底物及辅酶因子的酶活性或者底物的含量。

图1. Amplex Red与过氧化氢和过氧化物酶的反应原理图。

乙醇/乙醇脱氢酶活性检测原理(WST-8法)：

乙醇(Ethanol)在乙醇脱氢酶(ADH)的作用下氧化生成乙醛(Acetaldehyde)，在这一反应过程中NAD+被还原为NADH；生成的NADH在电子耦合试剂(Electron mediator)的作用下将WST-8还原生成橙黄色的Formazan，在450nm左右有最大吸收峰。反应体系中Formazan的生成量与样品中乙醇的含量/乙醇脱氢酶活性成正比。

图2.碧云天乙醇/乙醇脱氢酶活性检测试剂盒(WST-8法)(S0240/S0241)检测原理图。

琥珀酸脱氢酶活性检测试剂盒(显色法)：

琥珀酸脱氢酶催化琥珀酸脱氢生成延胡索酸，通过人工电子受体吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS)递氢将蓝色的2,6-二氯靛酚钠(DCIP)还原，DCIP在600nm处具有特征吸收峰，通过吸光度的变化即可测定DCIP的还原速度，进而间接反映琥珀酸脱氢酶的活性。

图3.碧云天琥珀酸脱氢酶活性检测试剂盒(显色法)(S0530)检测原理示意图。

产品灵敏度及线性范围

产品特点

• 样品用量少，检测快速：仅需少量的样品，最低仅需要0.1ul样品，即可在30分钟-1小时内完成检测；
• 检测方法灵活，检测灵敏度高：Amplex Red系列产品具有极高的灵敏度，并且可用荧光法和吸光度法两种方法检测。荧光法具有更高的灵敏度，是吸光度法的十倍，检测时可以用更少量的样品；
• 线性范围宽：本系列产品具有非常宽的线性范围，在较低或者较高的浓度范围内均能获得比较稳定可靠的实验结果；
• 检测裂解液具有通用性：提供的裂解液适用于所有使用相同裂解液的试剂盒，获得的样品可用于蛋白浓度检测、SDS-PAGE、WB等实验；
• 适用广泛：可用于小鼠、大鼠、人等的血清、血浆、尿液等生物体液，细胞培养上清、组织或细胞样品等的检测。本试剂盒不仅适合少量样本的检测，也非常适合高通量筛选的自动化操作系统。

产品效果

图1.碧云天Amplex Red L-乳酸检测试剂盒(S0227)检测L-乳酸标准品的标准曲线。左图为吸光度检测，右图为荧光检测。

图2.碧云天Amplex Red磷酸盐检测试剂盒(S0235)检测磷酸盐标准品的标准曲线。左图为吸光度检测，右图为荧光检测。

图3.碧云天Amplex Red乙醇检测试剂盒(S0239)检测乙醇标准品的标准曲线。左图为吸光度检测，右图为荧光检测。

图4.碧云天Amplex Red丙酮酸检测试剂盒(S0299)检测丙酮酸标准品的标准曲线。左图为吸光度检测，右图为荧光检测。

图5.碧云天乙醇检测试剂盒(WST-8法)(S0240)检测乙醇标准品的标准曲线。

图6.碧云天乙醇脱氢酶活性检测试剂盒(WST-8法)(S0241)检测乙醇脱氢酶标准品的标准曲线。

图7.碧云天Amplex Red ADP检测试剂盒(S0307)检测ADP标准品的标准曲线。左图为吸光度检测，右图为荧光检测。

图8.碧云天Amplex Red磷酸烯醇式丙酮酸检测试剂盒(S0311)检测磷酸烯醇式丙酮酸标准品的标准曲线。左图为吸光度检测，右图为荧光检测。

图9.碧云天Amplex Red α-酮戊二酸检测试剂盒(S0323)检测α-酮戊二酸标准品的标准曲线。左图为吸光度检测，右图为荧光检测。

图10.碧云天Amplex Red柠檬酸检测试剂盒(S0335)检测柠檬酸标准品的标准曲线。左图为吸光度检测，右图为荧光检测。

图11.碧云天Amplex Red草酰乙酸检测试剂盒(S0339)检测草酰乙酸标准品的标准曲线。左图为吸光度检测，右图为荧光检测。

图12.碧云天Amplex Red乙酰辅酶A合成酶检测试剂盒(S0391)检测乙酰辅酶A合成酶标准品的标准曲线。左图为吸光度检测，右图为荧光检测。

图13.碧云天Amplex Red琥珀酸检测试剂盒(S0529)检测琥珀酸标准品的标准曲线。左图为吸光度检测，右图为荧光检测。

图14.碧云天琥珀酸脱氢酶活性检测试剂盒(显色法)(S0530)对DCIP标准品和小鼠不同组织样品的检测效果。上图为本试剂盒对标准品DCIP的检测效果，在0-100nmol范围内有良好的线性关系；下图为80μg小鼠肌肉样品和90μg小鼠肝脏样品使用本试剂盒在反应30分钟内的信号变化图。

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