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| 产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
| S0335S | Amplex Red柠檬酸检测试剂盒 | 100次 | 598.00元 |
碧云天研发的Amplex Red柠檬酸检测试剂盒(Amplex Red Citrate Assay Kit，简称Amplex Red CA Assay Kit)是一种基于探针Amplex Red，利用荧光或吸光度检测，快速、高灵敏地对血清、血浆、尿液等生物体液、组织、细胞以及组织或细胞培养上清样品中柠檬酸与柠檬酸盐含量进行检测的试剂盒。通常0.5-2µl血清或血浆样品就足够用于本试剂盒的荧光法检测。
柠檬酸(Citric acid, CA)，又称枸橼酸，是一种三羧酸类化合物，分子式为C6H8O7，分子量为192.14。天然柠檬酸在自然界中分布很广，存在于植物如柠檬、柑橘、菠萝等果实和动物的骨骼、肌肉、血液等中。人工合成的柠檬酸可以使用砂糖、糖蜜、淀粉、葡萄等含糖物质发酵进行制备。纯品柠檬酸为无色透明结晶或白色粉末，并有一种诱人的酸味。柠檬酸主要用作酸味剂、增溶剂、缓冲剂、抗氧化剂、除腥脱臭剂、风味增进剂、胶凝剂、调色剂等，是一种广泛应用于食品、医药、日化等行业的重要有机酸[1, 2]。
在生物化学中，柠檬酸是三羧酸循坏的重要代谢中间产物，是生理学中将脂肪、蛋白质和糖转化为二氧化碳的过程中的重要化合物，这些化学反应是几乎所有代谢的核心反应，并且为生物体提供能量，因此柠檬酸在绝大部分生物的代谢中起到重要作用[3]。柠檬酸由草酰乙酸结合乙酰辅酶A(产生于糖酵解途径)上的乙酰基团而形成，可以从线粒体中转运出来并转化回乙酰辅酶A以进行脂肪酸合成，它是连接脂肪酸合成和糖酵解途径的桥梁[3]。
本试剂盒中的Amplex Red是一种对H2O2高度敏感的荧光探针。在辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase, HRP)存在的情况下，Amplex Red能与H2O2 1:1反应，产生强烈的红色荧光物质试卤灵(Resorufin)。试卤灵的最大激发波长为571nm，最大发射波长为585nm，并且在激发波长处有很强的可见光吸收。因此本试剂盒可以用吸光度和荧光两种方法来进行检测。
本试剂盒的检测原理请参考图1。柠檬酸(Citric acid)首先在柠檬酸裂解酶(Citrate lyase, CL)的作用下水解生成草酰乙酸(Oxalacetic acid, OAA)和醋酸盐(Acetate)，生成的草酰乙酸在草酸脱羧酶(Oxalate decarboxylase, OXDC)的催化作用下脱羧形成丙酮酸(Pyruvic acid)和二氧化碳。生成的丙酮酸在丙酮酸氧化酶(Pyruvate oxidase, PO)的作用下和氧气发生氧化反应生成乙酰磷酸(Acetyl phosphate)、CO2和H2O2，再通过检测H2O2与Amplex Red的反应产物试卤灵(Resorufin)的荧光强度或吸光度来最终计算样品中柠檬酸的含量。试卤灵的荧光强度或吸光度与样品中柠檬酸的含量成正比。
图1.碧云天Amplex Red柠檬酸检测试剂盒(S0335)检测原理图。
本试剂盒检测灵敏度高，线性范围宽，样品用量少。本试剂盒在样品体积为20µl时，采用吸光度检测可以检测浓度低至10μM的柠檬酸，在10-200μM浓度范围内有良好的线性关系；采用荧光检测可以检测浓度低至1μM的柠檬酸，在1-200μM浓度范围内有良好的线性关系。荧光检测的灵敏度比吸光度检测高约10倍，可以使用更少量的样品。本试剂盒提供了柠檬酸标准溶液，可以通过绘制标准曲线(图2)，计算出样品中的柠檬酸含量。
图2.碧云天Amplex Red柠檬酸检测试剂盒(S0335)检测柠檬酸标准品的标准曲线。20µl各浓度的柠檬酸标准品和80µl Amplex Red反应工作液混匀后，37ºC避光反应30分钟，进行吸光度和荧光检测。左图为吸光度检测，右图为荧光检测。本试剂盒采用吸光度检测时，在10-200µM浓度范围内有良好的线性关系；采用荧光检测时，在1-200µM浓度范围内有良好的线性关系。实际检测数据会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。
本试剂盒检测方法灵活，检测速度快。本试剂盒既可以进行荧光检测，也可进行吸光度检测。整个检测过程约30分钟即可完成。
本试剂盒提供的检测裂解液有一定的通用性。使用本试剂盒中的BeyoLysis™ Buffer A for Metabolic Assay裂解获得的细胞或组织样品，也可以用于碧云天生产的其它代谢类试剂盒中同样使用BeyoLysis™ Buffer A for Metabolic Assay进行裂解的样品检测，通用性强；而且还可用于检测蛋白浓度、进行SDS-PAGE或一些较易溶解蛋白的Western检测。
本试剂盒应用范围广。本试剂盒可用于小鼠、大鼠、人等的血清、血浆、尿液等生物体液，细胞培养上清、组织或细胞样品等的检测。本试剂盒不仅适合少量样本的检测，也非常适合高通量筛选(High-throughput screening)的自动化操作系统。
按照使用说明操作，用于96孔板检测时，本试剂盒小包装可以进行100次检测。
包装清单：| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| S0335S-1 | BeyoLysis™ Buffer A for Metabolic Assay | 20ml |
| S0335S-2 | Citrate Assay Buffer | 20ml |
| S0335S-3 | Amplex Red | 200µl |
| S0335S-4 | Enzyme Solution A | 200μl |
| S0335S-5 | Enzyme Solution B | 200μl |
| S0335S-6 | Cofactor | 200μl |
| S0335S-7 | Citrate Standard (10mM) | 200μl |
| － | 说明书 | 1份 |
-20ºC保存，一年有效。其中Amplex Red和Cofactor须避光保存。
注意事项：Amplex Red在空气中不太稳定，开启后应尽快使用，且在使用过程中需注意适当避光。
Amplex Red的反应产物在还原剂的存在下会很不稳定，因此最终反应体系中的二硫苏糖醇(DTT)、β-巯基乙醇或类似还原剂的浓度应低于10µM。
请确保反应体系的pH值在7-8之间，否则会影响Amplex Red的稳定性和荧光值。
Amplex Red和Citrate Assay Buffer需要完全解冻并平衡至室温后再使用，否则会影响检测结果。其它各种溶液使用时应在冰上进行。
经测试，本试剂盒相对稳定，检测所得的柠檬酸标准曲线的线性范围等通常和说明书中的描述一致，但是实际效果可能会因为实验条件、检测仪器等的不同而存在差异，例如最高浓度点的数据偏低或不在线性范围内等，通常可以舍去高浓度异常点的数据，取在线性范围内的数据来拟合标准曲线。
为减少稀释液产生的荧光背景带来的误差，样品和标准品的稀释液应该根据样品的种类来定。当样品为BeyoLysis™ Buffer A for Metabolic Assay制备的细胞或组织的裂解样品时，应使用BeyoLysis™ Buffer A for Metabolic Assay稀释，当样品为血液等其它样品时，宜使用Citrate Assay Buffer稀释。
血清、血浆等样品如果在4ºC保存，保存的时间不得超过2周，否则会影响检测结果的准确性。通常血清样品宜在-20ºC保存，-80ºC保存更佳。
荧光酶标仪检测时须使用适合荧光检测的黑板或白板，推荐使用碧云天BeyoGold™全黑96孔细胞培养板(平底带盖, 独立包装) (FCP966)或BeyoGold™黑色透明底96孔细胞培养板(平底带盖, 独立包装) (FCP965)。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
| Samples | 1 | 10 | 20 | 50 |
| Citrate Assay Buffer (µl) | 72 | 720 | 1440 | 3600 |
| Amplex Red (µl) | 2 | 20 | 40 | 100 |
| Enzyme Solution A (µl) | 2 | 20 | 40 | 100 |
| Enzyme Solution B (µl) | 2 | 20 | 40 | 100 |
| Cofactor (µl) | 2 | 20 | 40 | 100 |
| Working Solution (µl) | 80 | 800 | 1600 | 4000 |
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| C0016/C0017 | 乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒 | 100次/500次 |
| C0018 | 乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒(WST-8法) | 100次/500次 |
| C0019 | 乳酸脱氢酶释放检测试剂盒(WST-8法) | 100次/500次 |
| S0110S | 黄嘌呤氧化酶活性检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
| S0111S | 黄嘌呤氧化酶抑制剂筛选试剂盒(WST-8法) | 100次 |
| S0112 | Amplex Red黄嘌呤氧化酶活性检测试剂盒 | 100次/500次 |
| S0113S | Amplex Red黄嘌呤氧化酶抑制剂筛选试剂盒 | 100次 |
| S0114S | 黄嘌呤/次黄嘌呤检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
| S0183S | 果糖-6-磷酸检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
| S0185 | G6P检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
| S0187S | 磷酸葡萄糖异构酶活性检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
| S0189 | G6PDH活性检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
| S0201 | 葡萄糖检测试剂盒(O-toluidine法) | 200次/1000次 |
| S0202S | 葡萄糖检测试剂盒(显色法) | 100次 |
| S0204S | D-乳酸检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
| S0208S | L-乳酸检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
| S0211 | Amplex Red胆固醇与胆固醇酯检测试剂盒 | 100次/500次 |
| S0215 | Amplex Red游离脂肪酸检测试剂盒 | 100次/500次 |
| S0219 | Amplex Red甘油三酯检测试剂盒 | 100次/500次 |
| S0223 | Amplex Red甘油检测试剂盒 | 100次/500次 |
| S0227S | Amplex Red L-乳酸检测试剂盒 | 100次 |
| S0231S | Amplex Red尿酸与尿酸酶检测试剂盒 | 100次 |
| S0235S | Amplex Red磷酸盐检测试剂盒 | 100次 |
| S0239S | Amplex Red乙醇检测试剂盒 | 100次 |
| S0240S | 乙醇检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
| S0241S | 乙醇脱氢酶活性检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
| S0243 | Amplex Red黄嘌呤/次黄嘌呤检测试剂盒 | 100次/500次 |
| S0247S | Amplex Red谷氨酸与谷氨酸氧化酶检测试剂盒 | 100次 |
| S0251S | Amplex Red过氧化氢与过氧化物酶检测试剂盒 | 100次 |
| S0255S | Amplex Red过氧化氢酶检测试剂盒 | 100次 |
| S0259S | Amplex Red单胺氧化酶检测试剂盒 | 100次 |
| S0263S | Amplex Red鞘磷脂酶检测试剂盒 | 100次 |
| S0267S | Amplex Red胆碱与乙酰胆碱检测试剂盒 | 100次 |
| S0271S | Amplex Red乙酰胆碱酯酶检测试剂盒 | 100次 |
| S0275S | Amplex Red磷脂酰胆碱检测试剂盒 | 100次 |
| S0279S | Amplex Red磷脂酶D检测试剂盒 | 100次 |
| S0283S | Amplex Red肌酸检测试剂盒 | 100次 |
| S0287S | Amplex Red肌酸激酶检测试剂盒 | 100次 |
| S0291S | Amplex Red肌酐检测试剂盒 | 100次 |
| S0295S | Amplex Red肌氨酸检测试剂盒 | 100次 |
| S0299S | Amplex Red丙酮酸检测试剂盒 | 100次 |
| S0303S | Amplex Red丙酮酸激酶检测试剂盒 | 100次 |
| S0307S | Amplex Red ADP检测试剂盒 | 100次 |
| S0311S | Amplex Red磷酸烯醇式丙酮酸检测试剂盒 | 100次 |
| S0315S | Amplex Red丙氨酸检测试剂盒 | 100次 |
| S0319S | Amplex Red丙氨酸转氨酶检测试剂盒 | 100次 |
| S0323S | Amplex Red α-酮戊二酸检测试剂盒 | 100次 |
| S0327S | Amplex Red天冬氨酸检测试剂盒 | 100次 |
| S0331S | Amplex Red天冬氨酸氨基转移酶检测试剂盒 | 100次 |
| S0335S | Amplex Red柠檬酸检测试剂盒 | 100次 |
| S0339S | Amplex Red草酰乙酸检测试剂盒 | 100次 |
| S0343S | Amplex Red葡萄糖检测试剂盒 | 100次 |
| S0347S | Amplex Red葡萄糖氧化酶检测试剂盒 | 100次 |
| S0351S | Amplex Red果糖检测试剂盒 | 100次 |
| S0355S | Amplex Red乳糖检测试剂盒 | 100次 |
| S0359S | Amplex Red半乳糖与乳糖检测试剂盒 | 100次 |
| S0363S | Amplex Red半乳糖与半乳糖氧化酶检测试剂盒 | 100次 |
| S0367S | Amplex Red麦芽糖检测试剂盒 | 100次 |
| S0371S | Amplex Red麦芽糖与葡萄糖检测试剂盒 | 100次 |
| S0375S | Amplex Red糖原检测试剂盒 | 100次 |
| S0379S | Amplex Red磷酸果糖激酶检测试剂盒 | 100次 |
| S0383S | Amplex Red乙酰辅酶A检测试剂盒 | 100次 |
| S0387S | Amplex Red辅酶A检测试剂盒 | 100次 |
| S0391S | Amplex Red乙酰辅酶A合成酶检测试剂盒 | 100次 |
| S0511S | L-苹果酸检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
| S0514S | 苹果酸脱氢酶活性检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
| S0517S | 延胡索酸检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
| S0520S | 延胡索酸酶活性检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
| S0523S | 异柠檬酸检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
| S0526S | 异柠檬酸脱氢酶活性检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
| S0529S | Amplex Red琥珀酸检测试剂盒 | 100次 |
| S0530S | 琥珀酸脱氢酶活性检测试剂盒(显色法) | 100次 |
| S0532S | Amplex Red琥珀酰辅酶A合成酶检测试剂盒 | 100次 |
| S0535S | 支链氨基酸检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
| S0538S | N-乙酰氨基葡萄糖苷酶活性检测试剂盒(显色法) | 100次 |
| S0540S | 酪氨酸检测试剂盒(显色法) | 100次 |
| S0542S | 酪氨酸酶活性检测试剂盒(显色法) | 100次 |
| S0545S | 酪氨酸酶抑制剂筛选试剂盒(显色法) | 100次 |
| S0547S | 髓过氧化物酶活性检测试剂盒(显色法) | 100次 |
| S0548S | Amplex Red髓过氧化物酶活性检测试剂盒 | 100次 |
| S0550S | Amplex Red髓过氧化物酶抑制剂筛选试剂盒 | 100次 |
| S0554S | 葡萄糖摄取检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
| S0556S | 葡萄糖摄取检测试剂盒(DTNB法) | 100次 |
| P0321 | 碱性磷酸酶检测试剂盒 | 100次/500次 |
| P0322 | 碱性磷酸酶检测试剂盒(荧光法) | 100次/500次 |
| P0326 | 酸性磷酸酶检测试剂盒 | 120次 |
| P0327S | 酸性磷酸酶检测试剂盒(荧光法) | 100次 |
| P0329 | 胎盘碱性磷酸酶检测试剂盒 | 100次 |
| P0332 | 抗酒石酸酸性磷酸酶检测试剂盒 | 120次 |
| P0335 | 抗氟离子酸性磷酸酶检测试剂盒 | 120次 |
| P0392S | D-乳酸脱氢酶检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
| P0393S | L-乳酸脱氢酶检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
| P0395S | 总乳酸脱氢酶检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
| P0401S | 糖化酶活性检测试剂盒(显色法) | 100次 |
| P0405S | α-淀粉酶活性检测试剂盒(显色法) | 100次 |
| P0421S | 细胞色素C氧化酶活性检测试剂盒(显色法) | 100次 |
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