pRL-SV40-C(报告基因质粒)

 产品编号: D2768
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D2768 pRL-SV40-C(报告基因质粒) 1μg 862.00元

    pRL-SV40-C(报告基因质粒)是碧云天自行研发的用于在哺乳动物细胞中进行海肾萤光素酶(Renilla luciferase)报告基因检测的质粒,主要用于在其多克隆位点插入感兴趣的3’-UTR、启动子、增强子等调控元件研究该调控序列的基因转录调控活性,或用作萤火虫荧光素酶(firefly luciferase)报告基因检测时的内参。也可以使用Bam HI位点切除SV40 early enhancer/promoter,以降低本底性的转录,并插入感兴趣的3’-UTR等调控元件研究该调控序列的基因转录调控活性。研究5’-UTR并希望使用海肾荧光素酶时,推荐使用D2762 pRL-SV40-N
    pRL-SV40-C质粒含有SV40早期增强子和启动子,可以实现海肾荧光素酶在哺乳动物细胞内高效表达。
    pRL-SV40-N质粒携带renilla luciferase基因,编码分子量为36kD的海肾荧光素酶,翻译后无需修饰,常用于报告基因检测。
    本质粒为氨苄抗性。
    pRL-SV40-C质粒的主要信息如下:
    Feature Nucleotide                                                           Position
    SV40 early enhancer/promoter                                                 7-418
    Chimeric intron                                                              490-626
    T7 RNA polymerase transcription(-17 to +2)                                   670-688
    T7 RNA polymerase transcription initiation site                              687
    Rluc reporter gene                                                           698-1633
    Multiple cloning site                                                        1635-1701
    SV40 late polyadenylation signal                                             1781-1942
    β-lactamase (Ampr) coding region                                            2079-2494
    pRL-SV40-C质粒(3775bp)的图谱如下:
       
    pRL-SV40-C的多克隆位点的详细图谱如下:
                                              EcoRI
                    XhoI  SacI   MluI  HindIII       EcoRV SalI
    1631 TAATTCTAGG CTCGAGGAGC TCACGCGTAA GCTTGAATTC GATATCGTCG
         ATTAAGATCC GAGCTCCTCG AGTGCGCATT CGAACTTAAG CTATAGCAGC
           SpeI  ApaI   XbaI
    1681 ACACTAGTGG GCCCTCTAGA GCTAGAGCGG
         TGTGATCACC CGGGAGATCT CGATCTCGCC
    pRL-SV40-C中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pRL-SV40-C)包括:
    AgeI       AlwNI      ApaI       ApaLI      AscI      BbeI      BlpI
    BpmI       BsaI       BsgCI      Bsp120I    BssHI     Bst1107I  Bsu36I
    EagI       Eco47III   EcoNI      EheI       EspI      FseI      GsuI
    KasI       MmeI       MscI       MslI       NarI      NdeI      NotI
    NruI       NsiI       PstI       RsrI       SacII     SapI      SfiI
    SphI       SrfI       StuI       TfiI       Tth111I
    pRL-SV40-C中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pRL-SV40-C once)包括:

      BglII     A`GATC,T            1
      Acc65I    G`GTAC,C           54
      Asp718    G`GTAC,C           54
      KpnI      G,GTAC`C           58
      PvuII     CAG|CTG            80
      SfiI      GGCCN,NNN`NGGCC    357
      StuI      AGG|CCT            403
      AvrII     C`CTAG,G           404
      PstI      C,TGCA`G           466
      BspMI     ACCTGC 10/14       480
      BsiCI     TT`CG,AA           704
      BstBI     TT`CG,AA           704
      XcmI      CCANNNN,N`NNNNTGG  1347
      BsrGI     A`CGCG,T           1396
      BsaAI     YAC|GTR            1430
      AvaI      C`YCGR,G           1641
      PaeR7I    C`TCGA,G           1641
      XhoI      C`TCGA,G           1641
      SacI      G,AGCT`C           1651
      MluI      A`CGCG,T           1653
      HinDIII   A`AGCT,T           1659
      EcoRI     G`AATT,C           1665
      EcoRV     GAT|ATC            1673
      SalI      G`TCGA,C           1677
      AccI      GT`MK,AC           1678
      SpeI      A`CTAG,T           1683
      Bsp120I   G`GGCC,C           1689

EcoO109I   RG`GNC,CY                   1690
ApaI       G,GGCC`C                    1693
XbaI       T`CTAG,A                    1695
NotI       GC`GGCC,GC                  1708
EagI       C`GGCC,G                    1708
XmaIII     C`GGCC,G                    1708
HpaI       GTT|AAC                     1851
MunI       C`AATT,G                    1860
ClaI       AT`CG,AT                    1946
BsaBI      GATNN|NNATC                 1952
BamHI      G`GATC,C                    1953
SspI       AAT|ATT                     2071
Bsp1286I   G,DGCH`C                    2293
AhaII      GR`CG,YC                    2336
BsaHI      GR`CG,YC                    2336
HinII      GR`CG,YC                    2336
PvuI       CG,AT`CG                    2507
EcoNI      CCTNN`N,NNAGG               2515
Cfr10I     R`CCGG,Y                    2791
GsuI       CTGGAG 21/19                2806
BpmI       CTGGAG 22/20                2807
AhdI       GACNN,N`NNGTC               2876
PleI       GAGTC 9/10                  2885
HgiEII     ACCNNNNNNGGT-1/13           3175
AlwNI      CAG,NNN`CTG                 3355
HaeII      R,GCGC`Y                    3524

    pRL-SV40-C质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
    T7 Primer(670-688):TAATACGACTCACTATAGG
    pRL-SV40-C的全序列信息:D2768 pRL-SV40-C-seq.txt
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D2768

pRL-SV40-C(报告基因质粒)

1μg

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   -20℃保存。
注意事项:
    本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
    本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明

使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽
   提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. pRL-SV40-C质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入感兴趣的5’-UTR、启动子、增强子等调控元
   件,构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
3. pRL-SV40-C质粒或使用该质粒构建的新质粒转染细胞后,后续可以采用碧云天的海肾萤光素酶报告基
   因检测试剂盒(RG016/RG017)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG027/RG028)检测海肾荧光素酶的表
   达水平。
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