pCMV-C-DsRed

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产品编号	产品名称	产品包装	产品价格
D2624	pCMV-C-DsRed	1μg	862.00元

    pCMV-C-DsRed是碧云天自行研发的哺乳动物细胞表达质粒，用于表达C端含DsRed (Discosoma sp.
red fluorescent protein，香菇珊瑚红色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子，可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的后面有一个DsRed的完整编码序列，因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达C端含有DsRed标签的融合蛋白。利用DsRed的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位，也可以利用DsRed抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。DsRed与GFP没有序列同源性，不能使用GFP抗体检测DsRed。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后，可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
    pCMV-C-DsRed质粒的主要信息如下：
    Feature Nucleotide                                             Position
    CMV promoter                                                   1-602
    T3 promoter and T3 primer binding site                         620-639
    Multiple cloning site                                          651-740
    DsRed                                                          741-1419
    T7 promoter and T7 primer binding site                         1478-1499
    SV40 polyA signal                                              1511-1894
    f1 origin of ss-DNA replication                                2032-2338
    bla promoter                                                   2363-2487
    SV40 promoter                                                  2507-2845
    Neomycin/kanamycin resistance ORF                              2869-3661
    HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal                         3662-4130
    pUC origin                                                     4259-4926
    pCMV-C-DsRed质粒(4969bp)的图谱如下：

    pCMV-C-DsRed的多克隆位点的详细图谱如下：
                                           SmaI
         SacI    SacII    NotI          XmaI    BamHI HindIII
     651 GAGCTCCACC GCGGTGGCGG CCGCTCTAGC CCGGGCGGAT CCAAGCTTCT
         CTCGAGGTGG CGCCACCGCC GGCGAGATCG GGCCCGCCTA GGTTCGAAGA
             EcoRI EcoRV SalI         XhoI  XbaI   DsRed
     701 GCAGGAATTC GATATCGTCG ACAGATCTCT CGAGTCTAGA ATGGACAACA
         CGTCCTTAAG CTATAGCAGC TGTCTAGAGA GCTCAGATCT TACCTGTTGT
     751 CCGAGGACGT CATCAAGGAG TTCATGCAGT TCAAGGTGCG CATGGAGGGC
         GGCTCCTGCA GTAGTTCCTC AAGTACGTCA AGTTCCACGC GTACCTCCCG
     801 TCCGTGAACG GCCACTACTT CGAGATCGAG GGCGAGGGCG AGGGCAAGCC
         AGGCACTTGC CGGTGATGAA GCTCTAGCTC CCGCTCCCGC TCCCGTTCGG
     851 CTACGAGGGC ACCCAGACCG CCAAGCTGCA GGTGACCAAG GGCGGCCCCC
         GATGCTCCCG TGGGTCTGGC GGTTCGACGT CCACTGGTTC CCGCCGGGGG
     901 TGCCCTTCGC CTGGGACATC CTGTCCCCCC AGTTCCAGTA CGGCTCCAAG
         ACGGGAAGCG GACCCTGTAG GACAGGGGGG TCAAGGTCAT GCCGAGGTTC
     951 GCCTACGTGA AGCACCCCGC CGACATCCCC GACTACATGA AGCTGTCCTT
         CGGATGCACT TCGTGGGGCG GCTGTAGGGG CTGATGTACT TCGACAGGAA
    1001 CCCCGAGGGC TTCACCTGGG AGCGCTCCAT GAACTTCGAG GACGGCGGCG
         GGGGCTCCCG AAGTGGACCC TCGCGAGGTA CTTGAAGCTC CTGCCGCCGC
    1051 TGGTGGAGGT GCAGCAGGAC TCCTCCCTGC AGGACGGCAC CTTCATCTAC
         ACCACCTCCA CGTCGTCCTG AGGAGGGACG TCCTGCCGTG GAAGTAGATG
    1101 AAGGTGAAGT TCAAGGGCGT GAACTTCCCC GCCGACGGCC CCGTAATGCA
         TTCCACTTCA AGTTCCCGCA CTTGAAGGGG CGGCTGCCGG GGCATTACGT
    1151 GAAGAAGACT GCCGGCTGGG AGCCCTCCAC CGAGAAGCTG TACCCCCAGG
         CTTCTTCTGA CGGCCGACCC TCGGGAGGTG GCTCTTCGAC ATGGGGGTCC
    1201 ACGGCGTGCT GAAGGGCGAG ATCTCCCACG CCCTGAAGCT GAAGGACGGC
         TGCCGCACGA CTTCCCGCTC TAGAGGGTGC GGGACTTCGA CTTCCTGCCG
    1251 GGCCACTACA CCTGCGACTT CAAGACCGTG TACAAGGCCA AGAAGCCCGT
         CCGGTGATGT GGACGCTGAA GTTCTGGCAC ATGTTCCGGT TCTTCGGGCA
    1301 GCAGCTGCCC GGCAACCACT ACGTGGACTC CAAGCTGGAC ATCACCAACC
         CGTCGACGGG CCGTTGGTGA TGCACCTGAG GTTCGACCTG TAGTGGTTGG
    1351 ACAACGAGGA CTACACCGTG GTGGAGCAGT ACGAGCACGC CGAGGCCCGC
         TGTTGCTCCT GATGTGGCAC CACCTCGTCA TGCTCGTGCG GCTCCGGGCG
                             ApaI
    1401 CACTCCGGCT CCCAGTAGAG GGCCCGGTAC CTTAATTAAT TAAGGTACCA
         GTGAGGCCGA GGGTCATCTC CCGGGCCATG GAATTAATTA ATTCCATGGT
    pCMV-C-DsRed中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-C-DsRed)包括：
    AclI    AflII    AgeI       AscI     AsiSI    BaeI      BbvCI
    BcgI    BlpI     BmgBI      Bpu10I   BsiWI    BsmBI     BspEI
    BspQI   BssHII   BstZ17I    EarI     EcoNI    FseI      NruI
    PmeI    PmlI     PpuMI      PshAI    PspXI    SapI      ScaI
    SgrAI   SpeI     SwaI       XcmI     XmnI
    pCMV-C-DsRed中的单酶切位点（Restriction enzymes that cut pCMV-C-DsRed once）包括：

      NdeI     CA`TA,TG                      240
      SnaBI    TAC|GTA                       346
      CspCI    ,NN`(N)₁₁CAA(N)₅GTGG(N)₁₀,NN` 380
      NheI     G`CTAG,C                      597
      BmtI     G,CTAG`C                      597
      SacI     G,AGCT`C                      651
      Eco53kI GAG|CTC                       653
      BstXI    CCAN,NNNN`NTGG                659
      SacII    CC,GC`GG                      660
      NotI     GC`GGCC,GC                    668
      TspMI    C`CCGG,G                      680
      XmaI     C`CCGG,G                      680
      SmaI     CCC|GGG                       682
      SrfI     GCCC|GGGC                     682
      BamHI    G`GATC,C                      687
      HindIII A`AGCT,T                      693
      EcoRI    G`AATT,C                      705
      EcoRV    GAT|ATC                       713
      SalI     G`TCGA,C                      717
      AccI     GT`MK,AC                      718
      XhoI     C`TCGA,G                      729
      PaeR7I   C`TCGA,G                      729
      XbaI     T`CTAG,A                      735
      BstEII G`GTNAC,C                    881
      AhdI     GACNN,N`NNGTC                 919
      AfeI     AGC|GCT                       1023
      SbfI     CC,TGCA`GG                    1077

BbsI GAAGACNN`NNNN,

BsrGI

PflMI PspOMI ApaI PvuI BclI HpaI BtsI MluI SfiI ClaI BspDI KasI NarI BsrDI

   &nb     T3 primer C-DsRed primer (852-873):     pCMV-C-DsRed的全     pCMV-C-DsRed质粒               图1. 包装清单：              1161     T`GTAC,A                    1279     CCAN,NNN`NTGG               1319
   G`GGCC,C                    1420
     G,GGCC`C                    1420
     GCAGTG,NN`                  1500
     T`GATC,A                    1656
MfeI      C`AATT,G                    1749
     GTT|AAC                     1762
     GCAGTG,NN`                  1836
     A`CGCG,T                    1885
     GGCCN,NNN`NGGCC             2771
     AT`CG,AT                    2839
    AT`CG,AT                    2839
     G`GCGC,C                    2998
     GG`CG,CC                    2999
PluTI     G,GCGC`C                    2998
SfoI      GGC|GCC                     3000
MscI      TGG|CCA                     3081
Tth111I   GACN`N,NGTC                 3117
PflFI     GACN`N,NGTC                 3117
    GCAATG,NN`                  3230
RsrII     CG`GWC,CG                   3515
BstBI     TT`CG,AA                    3681
BsaI      GGTCTCN`NNNN,               3988
ApaLI     G`TGCA,C                    4603
PciI      A`CATG,T                    4917
sp;pCMV-C-DsRed质粒中推荐使用的测序引物序列如下：
(620-639): 5′-AATTAACCCTCACTAAAGGG-3
5′- TGGCGGTCTGGGTGCCCTCGTA -3′
序列信息：D2624 pCMV-C-DsRed-seq.txt
转染细胞后的表达效果请参考图1。

pCMV-C-DsRed质粒转染细胞后的表达效果图。左侧为明场照片，右侧为荧光照片。

产品编号	产品名称	包装
D2624	pCMV-C-DsRed	1μg
—	说明书	1份

保存条件：
   -20℃保存。
注意事项：
　  本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人
或单位。
    本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放
于普通住宅内。
    为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明

使用说明：
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。
抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
2. pCMV-C-DsRed质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因，构建的质粒可以用常规
　方法转染细胞。
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