产品简介：

    pCMV-N-YFP是碧云天自行研发的哺乳动物细胞表达质粒，用于表达N端含YFP(Yellow Fluorescent Protein, 黄色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子，可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的前面有一个YFP的完整编码序列，因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达N端含有YFP标签的融合蛋白。利用YFP的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位，也可以利用YFP抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。YFP与GFP高度相似，可以尝试用GFP抗体检测YFP。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后，可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
    pCMV-N-YFP质粒的主要信息如下：
    Feature Nucleotide                                             Position
    CMV promoter                                                   1-602
    T3 promoter and T3 primer binding site                         620-639
    YFP                                                            677-1393
    Multiple cloning site                                          1394-1483
    T7 promoter and T7 primer binding site                         1503-1524
    SV40 polyA signal                                              1536-1919
    f1 origin of ss-DNA replication                                2057-2363
    bla promoter                                                   2388-2512
    SV40 promoter                                                  2532-2870
    Neomycin/kanamycin resistance ORF                              2905-3696
    HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal                         3697-4155
    pUC origin                                                     4284-4951
    pCMV-N-YFP质粒(5003bp)的图谱如下：
       
    pCMV-N-YFP的多克隆位点的详细图谱如下：
        SacI                        YFP
    651 GAGCTCTAGC GCTACCGGTC GCCACCATGG TGAGCAAGGG CGAGGAGCTG
        CTCGAGATCG CGATGGCCAG CGGTGGTACC ACTCGTTCCC GCTCCTCGAC
    701 TTCACCGGGG TGGTGCCCAT CCTGGTCGAG CTGGACGGCG ACGTAAACGG
        AAGTGGCCCC ACCACGGGTA GGACCAGCTC GACCTGCCGC TGCATTTGCC
    751 CCACAAGTTC AGCGTGTCCG GCGAGGGCGA GGGCGATGCC ACCTACGGCA
        GGTGTTCAAG TCGCACAGGC CGCTCCCGCT CCCGCTACGG TGGATGCCGT
    801 AGCTGACCCT GAAGTTCATC TGCACCACCG GCAAGCTGCC CGTGCCCTGG
        TCGACTGGGA CTTCAAGTAG ACGTGGTGGC CGTTCGACGG GCACGGGACC
    851 CCCACCCTCG TGACCACCTT CGGCTACGGC GTGCAGTGCT TCGCCCGCTA
        GGGTGGGAGC ACTGGTGGAA GCCGATGCCG CACGTCACGA AGCGGGCGAT
    901 CCCCGACCAC ATGCGCCAGC ACGACTTCTT CAAGTCCGCC ATGCCCGAAG
        GGGGCTGGTG TACGCGGTCG TGCTGAAGAA GTTCAGGCGG TACGGGCTTC
    951 GCTACGTCCA GGAGCGCACC ATCTTCTTCA AGGACGACGG CAACTACAAG
        CGATGCAGGT CCTCGCGTGG TAGAAGAAGT TCCTGCTGCC GTTGATGTTC
   1001 ACCCGCGCCG AGGTGAAGTT CGAGGGCGAC ACCCTGGTGA ACCGCATCGA
        TGGGCGCGGC TCCACTTCAA GCTCCCGCTG TGGGACCACT TGGCGTAGCT
   1051 GCTGAAGGGC ATCGACTTCA AGGAGGACGG CAACATCCTG GGGCACAAGC
        CGACTTCCCG TAGCTGAAGT TCCTCCTGCC GTTGTAGGAC CCCGTGTTCG
   1101 TGGAGTACAA CTACAACAGC CACAACGTCT ATATCATGGC CGACAAGCAG
        ACCTCATGTT GATGTTGTCG GTGTTGCAGA TATAGTACCG GCTGTTCGTC
   1151 AAGAACGGCA TCAAGGTGAA CTTCAAGATC CGCCACAACA TCGAGGACGG
        TTCTTGCCGT AGTTCCACTT GAAGTTCTAG GCGGTGTTGT AGCTCCTGCC
   1201 CAGCGTGCAG CTCGCCGACC ACTACCAGCA GAACACCCCC ATCGGCGACG
        GTCGCACGTC GAGCGGCTGG TGATGGTCGT CTTGTGGGGG TAGCCGCTGC
   1251 GCCCCGTGCT GCTGCCCGAC AACCACTACC TGAGCTACCA GTCCGCCCTG
        CGGGGCACGA CGACGGGCTG TTGGTGATGG ACTCGATGGT CAGGCGGGAC
   1301 AGCAAAGACC CCAACGAGAA GCGCGATCAC ATGGTCCTGC TGGAGTTCGT
        TCGTTTCTGG GGTTGCTCTT CGCGCTAGTG TACCAGGACG ACCTCAAGCA
                                                       BamHI HindIII
   1351 GACCGCCGCC GGGATCACTC TCGGCATGGA CGAGCTGTAC AAGGGATCCA
        CTGGCGGCGG CCCTAGTGAG AGCCGTACCT GCTCGACATG TTCCCTAGGT
             PstI   EcoRI EcoRV  SalI  BglII  XhoI   XbaI  SpeI
   1401 AGCTTCTGCA GGAATTCGAT ATCGTCGACA GATCTCTCGA GTCTAGAACT
        TCGAAGACGT CCTTAAGCTA TAGCAGCTGT CTAGAGAGCT CAGATCTTGA
           ApaI
   1451 AGTGGGCCCG GTACCTTAAT TAATTAAGGT ACC
        TCACCCGGGC CATGGAATTA ATTAATTCCA TGG
    pCMV-N-YFP中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-N-YFP)包括：
    AclI      AflII      AhdI      AscI      AsiSI      BaeI      BbvCI
    BlpI      BmgBI      BsiWI     BsmBI     BspEI      BspQI     BssHII
    BstEII    BstXI      BstZ17I   EarI      EarI       EcoNI     FseI
    NotI      NruI       PflMI     PmeI      PmlI       PpuMI     PshAI
    PspXI     SacII      SapI      SbfI      ScaI       SgrAI     SmaI
    SwaI      TspMI      XcmI      XmaI      XmnI
    pCMV-N-YFP中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-N-YFP once)包括：

    pCMV-N-YFP质粒中推荐使用的测序引物序列如下：
    N-YFP primer (1284-1303): 5′-GCTACCAGTCCGCCCTGAGC-3′
    T7 primer (1503-1524): 5′-GTAATACGACTCACTATAGGGC-3′
    pCMV-N-YFP的全序列信息： D2716 pCMV-N-YFP-seq.txt
    
        图1. pCMV-N-YFP质粒转染细胞后的表达效果图。左侧为明场照片，右侧为荧光照片。
包装清单：

保存条件：
   -20℃保存。
注意事项：
    本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
    本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
    为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。