pCMV-N-DsRed(红色荧光蛋白)

 产品编号: D2705
 产品包装: 1μg
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产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D2705 pCMV-N-DsRed(红色荧光蛋白) 1μg 862.00元

    pCMV-N-DsRed是碧云天自行研发的哺乳动物细胞表达质粒,用于表达N端含DsRed (Discosoma
sp. red fluorescent protein,香菇珊瑚红色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子,可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的前面有一个DsRed的完整编码序列,并且在DsRed前面加入Kozak序列,因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达N端含有DsRed标签的融合蛋白。利用DsRed的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位,也可以利用DsRed抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。DsRed与GFP没有序列同源性,不能使用GFP抗体检测DsRed。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
    pCMV-N-DsRed质粒的主要信息如下:
    Feature Nucleotide                                             Position
    CMV promoter                                                   1-602
    T3 promoter and T3 primer binding site                         620-639
    Kozak sepuence                                                 656-662
    DsRed                                                          663-1337
    Multiple cloning site                                          1338-1403
    T7 promoter and T7 primer binding site                         1446-1468
    SV40 polyA signal                                              1481-1863
    f1 origin of ss-DNA replication                                2001-2307
    bla promoter                                                   2332-2451
    SV40 promoter                                                  2476-2814
    Neomycin/kanamycin resistance ORF                              2849-3641
    HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal                         3642-4099
    pUC origin                                                     4226-4892
    pCMV-N-DsRed质粒(4947bp)的图谱如下:
       
    pCMV-N-DsRed的多克隆位点的详细图谱如下:
         SacI Kozak  DsRedM
     651 GAGCTCGCCA CCATGGACAA CACCGAGGAC GTCATCAAGG AGTTCATGCA
         CTCGAGCGGT GGTACCTGTT GTGGCTCCTG CAGTAGTTCC TCAAGTACGT
     701 GTTCAAGGTG CGCATGGAGG GCTCCGTGAA CGGCCACTAC TTCGAGATCG
         CAAGTTCCAC GCGTACCTCC CGAGGCACTT GCCGGTGATG AAGCTCTAGC
     751 AGGGCGAGGG CGAGGGCAAG CCCTACGAGG GCACCCAGAC CGCCAAGCTG
         TCCCGCTCCC GCTCCCGTTC GGGATGCTCC CGTGGGTCTG GCGGTTCGAC
     801 CAGGTGACCA AGGGCGGCCC CCTGCCCTTC GCCTGGGACA TCCTGTCCCC
         GTCCACTGGT TCCCGCCGGG GGACGGGAAG CGGACCCTGT AGGACAGGGG
     851 CCAGTTCCAG TACGGCTCCA AGGCCTACGT GAAGCACCCC GCCGACATCC
         GGTCAAGGTC ATGCCGAGGT TCCGGATGCA CTTCGTGGGG CGGCTGTAGG
     901 CCGACTACAT GAAGCTGTCC TTCCCCGAGG GCTTCACCTG GGAGCGCTCC
         GGCTGATGTA CTTCGACAGG AAGGGGCTCC CGAAGTGGAC CCTCGCGAGG
     951 ATGAACTTCG AGGACGGCGG CGTGGTGGAG GTGCAGCAGG ACTCCTCCCT
         TACTTGAAGC TCCTGCCGCC GCACCACCTC CACGTCGTCC TGAGGAGGGA
    1001 GCAGGACGGC ACCTTCATCT ACAAGGTGAA GTTCAAGGGC GTGAACTTCC
         CGTCCTGCCG TGGAAGTAGA TGTTCCACTT CAAGTTCCCG CACTTGAAGG
    1051 CCGCCGACGG CCCCGTAATG CAGAAGAAGA CTGCCGGCTG GGAGCCCTCC
         GGCGGCTGCC GGGGCATTAC GTCTTCTTCT GACGGCCGAC CCTCGGGAGG
    1101 ACCGAGAAGC TGTACCCCCA GGACGGCGTG CTGAAGGGCG AGATCTCCCA
         TGGCTCTTCG ACATGGGGGT CCTGCCGCAC GACTTCCCGC TCTAGAGGGT
    1151 CGCCCTGAAG CTGAAGGACG GCGGCCACTA CACCTGCGAC TTCAAGACCG
         GCGGGACTTC GACTTCCTGC CGCCGGTGAT GTGGACGCTG AAGTTCTGGC
    1201 TGTACAAGGC CAAGAAGCCC GTGCAGCTGC CCGGCAACCA CTACGTGGAC
         ACATGTTCCG GTTCTTCGGG CACGTCGACG GGCCGTTGGT GATGCACCTG
    1251 TCCAAGCTGG ACATCACCAA CCACAACGAG GACTACACCG TGGTGGAGCA
         AGGTTCGACC TGTAGTGGTT GGTGTTGCTC CTGATGTGGC ACCACCTCGT
                                                 BamHI HindIII
    1301 GTACGAGCAC GCCGAGGCCC GCCACTCCGG CTCCCAGGGA TCCAAGCTTC
         CATGCTCGTG CGGCTCCGGG CGGTGAGGCC GAGGGTCCCT AGGTTCGAAG
            EcoRI  EcoRV SalI        XhoI    XbaI   SpeI  ApaI
    1351 TGCAGGAATT CGATATCGTC GACAGATCTC TCGAGTCTAG AACTAGTGGG
         ACGTCCTTAA GCTATAGCAG CTGTCTAGAG AGCTCAGATC TTGATCACCC
    pCMV-N-DsRed中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-N-DsRed)包括:
    AclI    AflII    AgeI       AscI     AsiSI    BaeI
    BcgI    BlpI     BmgBI      Bpu10I   BsiWI    BsmBI
    BspQI   BssHII   BstXI      BstZ17I  EarI     EcoNI
    NruI    PmeI     PmlI       PpuMI    PshAI    PspXI
    SapI    ScaI     SgrAI      SmaI     SrfI     SwaI
    XcmI    XmaI     XmnI
    pCMV-N-DsRed中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-N-DsRed once)包括:

      NdeI     CA`TA,TG                       240
      SnaBI    TAC|GTA                        346
      CspCI    ,NN`(N)11CAA(N)5GTGG(N)10,NN`  380
      NheI     G`CTAG,C                       597
      BmtI     G,CTAG`C                       597
      SacI     G,AGCT`C                       651
      Eco53kI  GAG|CTC                        653
      BstEII   G`GTNAC,C                      803
      AhdI     GACNN,N`NNGTC                  841
      AfeI     AGC|GCT                        945
      SbfI     CC,TGCA`GG                     999
      BbsI     GAAGACNN`NNNN,                 1083
      BsrGI    T`GTAC,A                       1201
      PflMI    CCAN,NNN`NTGG                  1241
      AleI     CACNN|NNGTG                    1290
      BamHI    G`GATC,C                       1338
      HindIII  A`AGCT,T                       1344
      EcoRI    G`AATT,C                       1356
      EcoRV    GAT|ATC                        1364
      SalI     G`TCGA,C                       1368
      AccI     GT`MK,AC                       1369
      PaeR7I   C`TCGA,G                       1380
      XhoI     C`TCGA,G                       1380
      XbaI     T`CTAG,A                       1386
      SpeI     A`CTAG,T                       1392

PspOMI   G`GGCC,C                    1398

ApaI     G,GGCC`C                    1398

PvuI     CG,AT`CG                    1478
BclI     T`GATC,A                    1634
MfeI     `AATT,G                     1727
HpaI     GTT|AAC                     1740
BtsI     GCAGTG,NN`                  1814
MluI     A`CGCG,T                    1863
SfiI     GGCCN,NNN`NGGCC             2749
ClaI     AT`CG,AT                    2873
BspDI    AT`CG,AT                    2873
EagI     C`GGCC,G                    2939
KasI     G`GCGC,C                    3032
PluTI    G,GCGC`C                    3032
NarI     GG`CG,CC                    3033
SfoI     GGC|GCC                     3034
MscI     TGG|CCA                     3115
PflFI    GACN`N,NGTC                 3151
Tth111I  GACN`N,NGTC                 3151
BsrDI    GCAATG,NN`                  3264
RsrII    CG`GWC,CG                   3549
BstBI    TT`CG,AA                    3715
BsaI     GGTCTCN`NNNN,               4022
ApaLI    G`TGCA,C                    4637
PciI     A`CATG,T                    4951

    pCMV-N-DsRed质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
    N-DsRed primer (1284-1303): 5′- TACACCGTGGTGGAGCAGTA -3′
  T7 primer (1447-1468): 5′- GTAATACGACTCACTATAGGGC -3′
    pCMV-N-DsRed的全序列信息:D2705 pCMV-N-DsRed-seq.txt
    pCMV-N-DsRed质粒转染细胞后的表达效果请参考图1。
          
      图1. pCMV-N-DsRed质粒转染细胞后的表达效果图。左侧为明场照片,右侧为荧光照片。
包装清单:

产品编号

产品名称

包装

D2705

pCMV-N-DsRed(红色荧光蛋白)

1μg

说明书

1份

保存条件:
   -20℃保存。
注意事项:
   本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人
或单位。
    本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放
于普通住宅内。
    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明

使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。
   抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. pCMV-N-DsRed质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,构建的质粒可以用常规
  方法转染细胞。
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产品编号

产品名称

包装

D2602

pCMV-Blank

1μg

D2621

pCMV-C-BFP(蓝色荧光蛋白)

1μg

D2623

pCMV-C-CFP(青色荧光蛋白)

1μg

D2624

pCMV-C-DsRed(红色荧光蛋白)

1μg

D2626

pCMV-C-EGFP(绿色荧光蛋白)

1μg

D2628

pCMV-C-mCherry(红色荧光蛋白)

1μg

D2630

pCMV-C-YFP(黄色荧光蛋白)

1μg

D2632

pCMV-C-Flag

1μg

D2639

pCMV-C-HA

1μg

D2650

pCMV-C-His

1μg

D2672

pCMV-C-Myc

1μg

D2701

pCMV-N-BFP(蓝色荧光蛋白)

1μg

D2703

pCMV-N-CFP(青色荧光蛋白)

1μg

D2705

pCMV-N-DsRed(红色荧光蛋白)

1μg

D2707

pCMV-N-EGFP(绿色荧光蛋白)

1μg

D2711

pCMV-N-mCherry(红色荧光蛋白)

1μg

D2716

pCMV-N-YFP(黄色荧光蛋白)

1μg

D2722

pCMV-N-Flag

1μg

D2733

pCMV-N-HA

1μg

D2737

pCMV-N-His

1μg

D2756

pCMV-N-Myc

1μg


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