pCMV-N-mCherry(红色荧光蛋白)

 产品编号: D2711
 产品包装: 1μg
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产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D2711 pCMV-N-mCherry(红色荧光蛋白) 1μg 862.00元

    pCMV-N-mCherry是碧云天自行研发的哺乳动物细胞表达质粒,用于表达N端含mCherry (DsRed的突变体,一种非常明亮的红色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子,可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的前面有一个mCherry的完整编码序列,因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达N端含有mCherry标签的融合蛋白。利用mCherry的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位,也可以利用mCherry抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。mCherry与GFP没有序列同源性,不能使用GFP抗体检测mCherry。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
    pCMV-N-EGFP质粒的主要信息如下:
    Feature Nucleotide                                             Position
    CMV promoter                                                   1-602
    T3 promoter and T3 primer binding site                         620-639
    mCherry                                                        677-1384
    Multiple cloning site                                          1385-1474
    T7 promoter and T7 primer binding site                         1494-1515
    SV40 polyA signal                                              1527-1910
    f1 origin of ss-DNA replication                                2048-2354
    bla promoter                                                   2379-2503
    SV40 promoter                                                  2523-2861
    Neomycin/kanamycin resistance ORF                              2896-3687
    HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal                         3688-4146
    pUC origin                                                     4275-4942
    pCMV-N-mCherry质粒(4994bp)的图谱如下:
       
    pCMV-N-mCherry的多克隆位点的详细图谱如下:
         SacI                        mCherry
     651 GAGCTCTAGC GCTACCGGTC GCCACCATGG TGAGCAAGGG CGAGGAGGAT
         CTCGAGATCG CGATGGCCAG CGGTGGTACC ACTCGTTCCC GCTCCTCCTA
     701 AACATGGCCA TCATCAAGGA GTTCATGCGC TTCAAGGTGC ACATGGAGGG
         TTGTACCGGT AGTAGTTCCT CAAGTACGCG AAGTTCCACG TGTACCTCCC
     751 CTCCGTGAAC GGCCACGAGT TCGAGATCGA GGGCGAGGGC GAGGGCCGCC
         GAGGCACTTG CCGGTGCTCA AGCTCTAGCT CCCGCTCCCG CTCCCGGCGG
     801 CCTACGAGGG CACCCAGACC GCCAAGCTGA AGGTGACCAA GGGTGGCCCC
         GGATGCTCCC GTGGGTCTGG CGGTTCGACT TCCACTGGTT CCCACCGGGG
     851 CTGCCCTTCG CCTGGGACAT CCTGTCCCCT CAGTTCATGT ACGGCTCCAA
         GACGGGAAGC GGACCCTGTA GGACAGGGGA GTCAAGTACA TGCCGAGGTT
     901 GGCCTACGTG AAGCACCCCG CCGACATCCC CGACTACTTG AAGCTGTCCT
         CCGGATGCAC TTCGTGGGGC GGCTGTAGGG GCTGATGAAC TTCGACAGGA
     951 TCCCCGAGGG CTTCAAGTGG GAGCGCGTGA TGAACTTCGA GGACGGCGGC
         AGGGGCTCCC GAAGTTCACC CTCGCGCACT ACTTGAAGCT CCTGCCGCCG
    1001 GTGGTGACCG TGACCCAGGA CTCCTCCCTG CAGGACGGCG AGTTCATCTA
         CACCACTGGC ACTGGGTCCT GAGGAGGGAC GTCCTGCCGC TCAAGTAGAT
    1051 CAAGGTGAAG CTGCGCGGCA CCAACTTCCC CTCCGACGGC CCCGTAATGC
         GTTCCACTTC GACGCGCCGT GGTTGAAGGG GAGGCTGCCG GGGCATTACG
    1101 AGAAGAAGAC CATGGGCTGG GAGGCCTCCT CCGAGCGGAT GTACCCCGAG
         TCTTCTTCTG GTACCCGACC CTCCGGAGGA GGCTCGCCTA CATGGGGCTC
    1151 GACGGCGCCC TGAAGGGCGA GATCAAGCAG AGGCTGAAGC TGAAGGACGG
         CTGCCGCGGG ACTTCCCGCT CTAGTTCGTC TCCGACTTCG ACTTCCTGCC
    1201 CGGCCACTAC GACGCTGAGG TCAAGACCAC CTACAAGGCC AAGAAGCCCG
         GCCGGTGATG CTGCGACTCC AGTTCTGGTG GATGTTCCGG TTCTTCGGGC
    1251 TGCAGCTGCC CGGCGCCTAC AACGTCAACA TCAAGTTGGA CATCACCTCC
         ACGTCGACGG GCCGCGGATG TTGCAGTTGT AGTTCAACCT GTAGTGGAGG
    1301 CACAACGAGG ACTACACCAT CGTGGAACAG TACGAACGCG CCGAGGGCCG
         GTGTTGCTCC TGATGTGGTA GCACCTTGTC ATGCTTGCGC GGCTCCCGGC
                                              BamHI  HindIII
    1351 CCACTCCACC GGCGGCATGG ACGAGCTGTA CAAGGGATCC AAGCTTCTGC
         GGTGAGGTGG CCGCCGTACC TGCTCGACAT GTTCCCTAGG TTCGAAGACG
           EcoRI EcoRV  SalI   BglII XhoI   XbaI  SpeI   ApaI
    1401 AGGAATTCGA TATCGTCGAC AGATCTCTCG AGTCTAGAAC TAGTGGGCCC
         TCCTTAAGCT ATAGCAGCTG TCTAGAGAGC TCAGATCTTG ATCACCCGGG
    pCMV-N-mCherry中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-N-mCherry)
包括:
    AclI      AflII   AscI        AsiSI     BaeI    BcgI     BlpI
    BmgBI     BsiWI   BsmBI       BspEI     BspQI   BssHII   BstXI
    BstZ17I   EarI    EcoNI       FseI      NotI    NruI     PmeI
    PmlI      PpuMI   PshAI       PspXI     SacII   SapI     ScaI
    SmaI      SwaI    TspMI       XmaI      XmnI
    pCMV-N-EGFP中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-N-EGFP once)包括:

      NdeI     CA`TA,TG                       240
      SnaBI    TAC|GTA                        346
      CspCI    ,NN`(N)11CAA(N)5GTGG(N)10,NN`  382
      NheI     G`CTAG,C                       597
      BmtI     G,CTAG`C                       597
      SacI     G,AGCT`C                       651
      Eco53kI  GAG|CTC                        653
      AfeI     AGC|GCT                        660
      AgeI     A`CCGG,T                       664
      AhdI     GACNN,N`NNGTC                  871
      SbfI     CC,TGCA`GG                     1032
      BbsI     GAAGACNN`NNNN,                 1112
      PflMI    CCAN,NNN`NTGG                  1113
      BbvCI    CC`TCA,GC                      1215
      Bpu10I   CC`TNA,GC                      1215
      BsgI     GTGCAG(N)14,NN`                1269
      SgrAI    CR`CCGG,YG                     1358
      XcmI     CCANNNN,N`NNNNTGG              1362
      BsrGI    T`GTAC,A                       1377
      BamHI    G`GATC,C                       1385
      HindIII  A`AGCT,T                       1391
      EcoRI    G`AATT,C                       1403
      EcoRV    GAT|ATC                        1411
      SalI     G`TCGA,C                       1415
      AccI     GT`MK,AC                       1416

BglII    A`GATC,T                    1421

PaeR7I   C`TCGA,G                    1427

XhoI     C`TCGA,G                    1427
XbaI     T`CTAG,A                    1433
SpeI     A`CTAG,T                    1439
PspOMI   G`GGCC,C                    1445
ApaI     G,GGCC`C                    1445
PvuI     CG,AT`CG                    1525
BclI     T`GATC,A                    1681
MfeI     C`AATT,G                    1774
HpaI     GTT|AAC                     1787
BtsI     GCAGTG,NN`                  1861
MluI     A`CGCG,T                    1910
DraIII   CAC,NNN`GTG                 2137
SfiI     GGCCN,NNN`NGGCC             2796
ClaI     AT`CG,AT                    2864
BspDI    AT`CG,AT                    2864
EagI     C`GGCC,G                    2930
Tth111I  GACN`N,NGTC                 3142
PflFI    GACN`N,NGTC                 3142
BsrDI    GCAATG,NN`                  3257
RsrII    CG`GWC,CG                   3540
BstBI    TT`CG,AA                    3706
BsaI     GGTCTCN`NNNN,               4013
PciI     A`CATG,T                    4942

    pCMV-N-mCherry质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
    N-mCherry primer (1284-1303): 5′-AGTTGGACATCACCTCCCAC-3′
  T7 primer (1494-1515): 5′-GTAATACGACTCACTATAGGGC-3′
    pCMV-N-mCherry的全序列信息:D2711 pCMV-N-mCherry-seq.txt
    pCMV-N-mCherry质粒转染细胞后的表达效果请参考图1。
          
      图1. pCMV-N-mCherry质粒转染细胞后的表达效果图。左侧为明场照片,右侧为荧光照片。
包装清单:

产品编号

产品名称

包装

D2711

pCMV-N-mCherry(红色荧光蛋白)

1μg

说明书

1份

保存条件:
   -20℃保存。
注意事项:
   本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人
或单位。
    本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放
于普通住宅内。
    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明

使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。
   抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. pCMV-N-mCherry质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,构建的质粒可以用常规
  方法转染细胞。
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产品编号

产品名称

包装

D2602

pCMV-Blank

1μg

D2621

pCMV-C-BFP(蓝色荧光蛋白)

1μg

D2623

pCMV-C-CFP(青色荧光蛋白)

1μg

D2624

pCMV-C-DsRed(红色荧光蛋白)

1μg

D2626

pCMV-C-EGFP(绿色荧光蛋白)

1μg

D2628

pCMV-C-mCherry(红色荧光蛋白)

1μg

D2630

pCMV-C-YFP(黄色荧光蛋白)

1μg

D2632

pCMV-C-Flag

1μg

D2639

pCMV-C-HA

1μg

D2650

pCMV-C-His

1μg

D2672

pCMV-C-Myc

1μg

D2701

pCMV-N-BFP(蓝色荧光蛋白)

1μg

D2703

pCMV-N-CFP(青色荧光蛋白)

1μg

D2705

pCMV-N-DsRed(红色荧光蛋白)

1μg

D2707

pCMV-N-EGFP(绿色荧光蛋白)

1μg

D2711

pCMV-N-mCherry(红色荧光蛋白)

1μg

D2716

pCMV-N-YFP(黄色荧光蛋白)

1μg

D2722

pCMV-N-Flag

1μg

D2733

pCMV-N-HA

1μg

D2737

pCMV-N-His

1μg

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