产品简介：

    pCMV-N-EGFP是碧云天自行研发的哺乳动物细胞表达质粒，用于表达N端含EGFP(Enhanced Green
Fluorescent Protein, 增强绿色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子，可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的前面有一个EGFP的完整编码序列，因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达N端含有EGFP标签的融合蛋白。利用EGFP的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位，也可以利用EGFP抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后，可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
    pCMV-N-EGFP质粒的主要信息如下：
    Feature Nucleotide                                             Position
    CMV promoter                                                   1-602
    T3 promoter and T3 primer binding site                         620-639
    EGFP                                                           677-1393
    Multiple cloning site                                          1394-1483
    T7 promoter and T7 primer binding site                         1503-1524
    SV40 polyA signal                                              1536-1919
    f1 origin of ss-DNA replication                                2057-2363
    bla promoter                                                   2388-2512
    SV40 promoter                                                  2532-2870
    Neomycin/kanamycin resistance ORF                              205-3696
    HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal                         3697-4155
    pUC origin                                                     4284-4951
    pCMV-N-EGFP质粒(5003bp)的图谱如下：
     
    pCMV-N-EGFP的多克隆位点的详细图谱如下：
         SacI                        EGFP
     651 GAGCTCTAGC GCTACCGGTC GCCACCATGG TGAGCAAGGG CGAGGAGCTG
         CTCGAGATCG CGATGGCCAG CGGTGGTACC ACTCGTTCCC GCTCCTCGAC
     701 TTCACCGGGG TGGTGCCCAT CCTGGTCGAG CTGGACGGCG ACGTAAACGG
         AAGTGGCCCC ACCACGGGTA GGACCAGCTC GACCTGCCGC TGCATTTGCC
     751 CCACAAGTTC AGCGTGTCCG GCGAGGGCGA GGGCGATGCC ACCTACGGCA
         GGTGTTCAAG TCGCACAGGC CGCTCCCGCT CCCGCTACGG TGGATGCCGT
     801 AGCTGACCCT GAAGTTCATC TGCACCACCG GCAAGCTGCC CGTGCCCTGG
         TCGACTGGGA CTTCAAGTAG ACGTGGTGGC CGTTCGACGG GCACGGGACC
     851 CCCACCCTCG TGACCACCCT GACCTACGGC GTGCAGTGCT TCAGCCGCTA
         GGGTGGGAGC ACTGGTGGGA CTGGATGCCG CACGTCACGA AGTCGGCGAT
     901 CCCCGACCAC ATGAAGCAGC ACGACTTCTT CAAGTCCGCC ATGCCCGAAG
         GGGGCTGGTG TACTTCGTCG TGCTGAAGAA GTTCAGGCGG TACGGGCTTC
     951 GCTACGTCCA GGAGCGCACC ATCTTCTTCA AGGACGACGG CAACTACAAG
         CGATGCAGGT CCTCGCGTGG TAGAAGAAGT TCCTGCTGCC GTTGATGTTC
    1001 ACCCGCGCCG AGGTGAAGTT CGAGGGCGAC ACCCTGGTGA ACCGCATCGA
         TGGGCGCGGC TCCACTTCAA GCTCCCGCTG TGGGACCACT TGGCGTAGCT
    1051 GCTGAAGGGC ATCGACTTCA AGGAGGACGG CAACATCCTG GGGCACAAGC
         CGACTTCCCG TAGCTGAAGT TCCTCCTGCC GTTGTAGGAC CCCGTGTTCG
    1101 TGGAGTACAA CTACAACAGC CACAACGTCT ATATCATGGC CGACAAGCAG
         ACCTCATGTT GATGTTGTCG GTGTTGCAGA TATAGTACCG GCTGTTCGTC
    1151 AAGAACGGCA TCAAGGTGAA CTTCAAGATC CGCCACAACA TCGAGGACGG
         TTCTTGCCGT AGTTCCACTT GAAGTTCTAG GCGGTGTTGT AGCTCCTGCC
    1201 CAGCGTGCAG CTCGCCGACC ACTACCAGCA GAACACCCCC ATCGGCGACG
         GTCGCACGTC GAGCGGCTGG TGATGGTCGT CTTGTGGGGG TAGCCGCTGC
    1251 GCCCCGTGCT GCTGCCCGAC AACCACTACC TGAGCACCCA GTCCGCCCTG
         CGGGGCACGA CGACGGGCTG TTGGTGATGG ACTCGTGGGT CAGGCGGGAC
    1301 AGCAAAGACC CCAACGAGAA GCGCGATCAC ATGGTCCTGC TGGAGTTCGT
         TCGTTTCTGG GGTTGCTCTT CGCGCTAGTG TACCAGGACG ACCTCAAGCA
                                                        BamHI HindIII
    1351 GACCGCCGCC GGGATCACTC TCGGCATGGA CGAGCTGTAC AAGGGATCCA
         CTGGCGGCGG CCCTAGTGAG AGCCGTACCT GCTCGACATG TTCCCTAGGT
              PstI   EcoRI EcoRV  SalI  BglII  XhoI   XbaI  SpeI
    1401 AGCTTCTGCA GGAATTCGAT ATCGTCGACA GATCTCTCGA GTCTAGAACT
         TCGAAGACGT CCTTAAGCTA TAGCAGCTGT CTAGAGAGCT CAGATCTTGA
            ApaI
    1451 AGTGGGCCCG GTACCTTAAT TAATTAAGGT ACC
         TCACCCGGGC CATGGAATTA ATTAATTCCA TGG
    pCMV-N-EGFP中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-N-EGFP)包括：
    AclI     AflII    AhdI       AscI     AsiSI    BaeI     BbsI
    BbvCI    BlpI     BmgBI      BsiWI    BsmBI    BspEI    BspQI
    BssHII   BstEII   BstXI      BstZ17I  EarI     EcoNI    FseI
    NotI     NruI     PflMI      PmeI     PmlI     PpuMI    PshAI
    PspXI    SacII    SapI       SbfI     ScaI     SgrAI    SmaI
    SwaI     TspMI    XcmI       XmaI     XmnI
    pCMV-N-EGFP中的单酶切位点（Restriction enzymes that cut pCMV-N-EGFP once）包括：

    pCMV-N-EGFP质粒中推荐使用的测序引物序列如下：
    N-EGFP primer (1284-1303): 5′-GCACCCAGTCCGCCCTGAGC-3′
　　T7 primer (1503-1524): 5′-GTAATACGACTCACTATAGGGC-3′
    pCMV-N-EGFP的全序列信息：D2707 pCMV-N-EGFP-seq.txt
    pCMV-N-EGFP质粒转染细胞后的表达效果请参考图1。
          
      图1. pCMV-N-EGFP质粒转染细胞后的表达效果图。左侧为明场照片，右侧为荧光照片。
包装清单：

保存条件：
   -20℃保存。
注意事项：
　  本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人
或单位。
    本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放
于普通住宅内。
    为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。